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团头鲂(Megalobrama amblyocephala),俗称鳊、武昌鱼,隶属鲤形目(Cypriniformes),鲤科(Cyprinidate),鲂属(Megalobrama)。团头鲂因食性广、生长快、成活率高、易捕捞及规格适中等优点被作为优良的草食性鱼类品种在全国大力推广,养殖产量整体上呈现不断增加的趋势,年产值超过100亿元。相较于其他鱼类,团头鲂对于外界刺激的耐受能力差,在养殖生产或者运输过程中受到外界刺激时,应激反应强烈,易造成受伤甚至死亡。养殖密度和低氧,是生产实践中常见的胁迫因子。在本研究中设计两个实验,分别研究低氧胁迫和养殖密度对团头鲂的影响。过去的研究中,有养殖密度对团头鲂血清生理生化、酶活系统、免疫系统和生长发育等方面的研究,但鲜有对肠道微生物作出研究的。本实验研究了不同放养密度对团头鲂幼鱼的生长性能、生理生化指标、肠道菌群和肠道组织结构的影响。试图从新的视角来解决问题。实验将同源同批同规格的幼鱼随机分组,本实验共设置四个密度组:30F组(30尾/立方米;对照组)、60F组(60尾/立方米)、90F组(90尾/立方米)和120F组(120尾/立方米)。本实验采用网箱养殖,使不同水环境因素(如酸碱度、盐度、溶解氧、水温、环境微生物)能保持一致。结果表明,较高的放养密度对生长性能有负面影响,随着饲养密度的增加,脏体比、肝体比和存活率均显著下降。随着饲养密度的增加,血清中的皮质醇、甘油三酯、谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶均显著增加,同时血糖和总胆固醇均显著下降。随着饲养密度的增加,肠道中脂肪酶和蛋白酶活性显著下降,肝脏中的谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性也显著下降,而丙二醛含量显著增加。肠道菌群结构有明显组间差异。和水产密切相关的菌群中,随着饲养密度的增加,不动杆菌、气单胞菌、假单胞菌和弧菌数均显著增加而梭杆菌、拟杆菌、乳球菌、乳酸杆菌和芽孢杆菌数均显著下降。结果表明,90F组和120F组肠道的固有层损伤,杯状细胞明显增大,表明肠道可能有炎症反应。由于集群效应的影响,当养殖密度小于60尾/立方米时,特定生长率和增重率随放养密度显著增加,当放养密度超过60尾/立方米时则随密度增加而显著降低。第二个实验设计的是急性低氧胁迫对团头鲂的生理生化指标及鳃、肝和肾显微结构的影响。过去研究中的窒息点因为定义不同,实验条件不同,研究结果有很大差异,且极限低氧对实际生产的参考价值有限。本研究模拟实践生产中急性缺氧的情况,探究团头鲂的24 h半致死溶氧浓度。过去的低氧研究中往往聚焦肝脏,关注肾脏的鲜见,本研究对此项数据做出补充。本实验将同源同批同规格的团头鲂随机分组。实验组持续保持低氧(1.2±0.2 mg/L),0h、3h、6h、12h和24h共采样5次,然后打开增氧,复氧24 h,即在实验开始后48h取第6次样。结果表明,随着持续低氧的时间的增加,血清中的皮质醇、乳酸脱氢酶、血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶含量均显著增加。复氧24小时后,皮质醇、乳酸脱氢酶和血糖有显著回落。持续低氧下,肝脏中的过氧化氢酶和超氧化物歧化酶随着时间的推进而显著下降,而谷胱甘肽过氧化物酶和丙二醛含量显著增加。复氧24小时后,谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量有显著回落。从鳃的光镜切片看,低氧胁迫后,鳃的结构发生了变化,鳃小片出现充血,末端卷曲变形,严重的能观察到鳃小片融合。上皮细胞有明显水肿,细胞轮廓变得不清晰,可见坏死、脱落。复氧24 h后,损伤仍未完全修复。肝脏切片上,低氧处理后,细胞边界模糊,肝窦肝索变宽,巨噬细胞膨大。肝细胞中脂肪液滴变大,可见肝细胞的空泡化及细胞核偏移等现象。说明发生肝脏充血,肝细胞脂肪变性,低氧下鱼体的代谢途径发生了改变。复氧24 h后显微结构未见明显好转。低氧胁迫对肾脏有负面影响,可见肾小球萎缩,肾小囊腔膨大,肾小管管腔缩小,肾小管上皮细胞肿大、坏死、空泡化、水样变性,甚至肾小球坏死,肾小管坏死。复氧24 h后组织结构未见明显好转。本实验探究在养殖密度和低氧胁迫的刺激下,团头鲂受到的影响,对降低养殖过程中团头鲂的应激有较大的参考意义,对团头鲂抗应激品种的选育奠定了理论基础。