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目的: 兴奋性神经递质和抑制性神经递质的平衡维持着大脑正常的生理功能，脑缺血诱导的兴奋性的增强和抑制性的减弱是打破这种平衡的原因之一。过去研究较多的是脑缺血时NMDA受体介导的谷氨酸兴奋毒促进了海马CA1区神经元的死亡，而对于GABA受体被激活后在脑缺血性损伤中的作用机制仍不清楚。本实验主要探讨在脑缺血性损伤时增强GABA受体的活化对海马CA1区神经元的作用和对NMDA受体介导的神经型一氧化氮合酶(nNOS)产生的一氧化氮(NO)的影响及可能的分子作用机制。
方法: 采用四动脉结扎法制作成年SD雄性大鼠全脑缺血模型。实验动物随机分为假手术组、缺血/再灌组、溶剂对照组和给药组，并用免疫沉淀、免疫印迹、焦油紫染色、免疫组化、TUNEL染色等技术观察相应指标的变化。
结果:
1.焦油紫染色发现GABAA受体的激动剂蝇蕈醇和GABAB受体的激动剂氯苯氨丁酸对缺血海马CA1区神经元有保护作用，而二者联合用药保护作用更强。
2.联合给予蝇蕈醇和氯苯氨丁酸后，在缺血复灌6小时或1天能增强nNOS(Ser847)的磷酸化和nNOS与PSD95的结合。
3.NMDAR的抑制剂MK801增强了缺血复灌6小时或1天时的nNOS(Ser847)的磷酸化和nNOS与PSD95的结合。
4.在缺血复灌1天时，蛋白磷酸酶CaN和PP1/PP2A的抑制剂(FK506和OA)增强了nNOS(Ser847)的磷酸化和nNOS与PSD95的结合。
5.p-nNOS(Ser847)6小时和1天的免疫组化结果表明海马CA1区神经元的免疫反应性的改变同免疫印迹结果中nNOS(Ser847)的磷酸化的变化一致。
6.给予MK801、FK506和OA后，焦油紫染色结果表明给药组明显挽救了海马CA1区神经元的缺失和死亡；TUNEL染色结果发现给药组的海马CA1区凋亡细胞明显减少。
结论: 在全脑缺血复灌模型中，GABAA、GABAB受体共活化对缺血后神经元有保护作用。GABA受体激动剂通过促进nNOS与PSD95的结合增加nNOS(Ser847)的磷酸化。GABA受体激动剂的保护作用可能与减少NMDA受体介导的nNOS产生的NO有关。在缺血复灌1天时，蛋白磷酸酶(PP1/PP2A、CaN)参与nNOS去磷酸化的调节。