慢性胃炎脾虚湿热证疗效与舌象及舌苔蛋白质组学研究

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目的:观察中医药治疗慢性胃炎脾虚湿热证证候疗效及该病证的特征性舌象,用蛋白质组学的方法分析特征性舌苔,探寻有中医特色的客观诊断、疗效指标。   方法:用导师自拟健脾清胃方治疗慢性胃炎脾虚湿热证,以中医证候疗效为依据,观察治疗前后舌象改变情况,并用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SurfaceEnhanced Laster Desorption Ionization Time Of Flight Mass Spectrometry,SELDI-TOF-MS)对慢性胃炎脾虚湿热证患者与正常人、慢性胃炎脾虚湿热证患者治疗前后的舌苔蛋白质进行对比分析,进一步采用决策树方法,建立慢性胃炎脾虚湿热证特征性舌苔模型、慢性胃炎脾虚湿热证治疗前后舌苔改善模型,寻找两个模型中特异性生物标记物。   结果:1)健脾清胃方治疗慢性胃炎脾虚湿热证,大部分症状逐渐改善,证候、症状改善总有效率分别为92.06%、93.65%,尤以胃脘疼痛、泛酸、纳呆、口苦等症状改善最明显。2)脾虚湿热证特征性舌象为红舌、黄厚腻苔。经健脾清胃方治疗后大部分舌象逐渐改善。以淡红舌、红舌、黄苔、白苔、薄苔、薄腻苔改变最明显。3)疗后症状、舌象改善趋势较一致。部分症状的改善与脾虚湿热证特征性舌象的改善密切相关。舌象尤其是舌苔较症状更为灵敏地反应体内脾虚湿热情况的改善。4)正常组与治疗组治疗前比较,结果有明显差异。有189个差异蛋白峰,正常组舌苔差异蛋白峰为低表达,治疗组治疗前舌苔差异蛋白峰为高表达。治疗组治疗前、后有一定差异,差异蛋白峰30个,疗后差异蛋白峰或高表达或低表达。细分结果说明,疗后舌苔差异蛋白表达早于舌苔临床改善,苔色变化程度与差异蛋白峰数量有关。2)建立慢性胃炎脾虚湿热证特征性舌苔模型,模型正确率为91.67%(55/60),灵敏度为100.00%(30/30),特异性为83.33%(25/30),1148.59Da、1000.30 Da两个差异蛋白峰组成模型特异性生物标记物。在模型中两个差异蛋白峰均为高表达,在正常对照组中均为低表达,说明脾虚湿热证特征性舌苔与两个差异蛋白峰的变化密切相关,治疗前1148.59Da、1000.30 Da蛋白峰的高表达,可能与特征性舌苔的形成有关。3)建立慢性胃炎脾虚湿热证治疗前后舌苔改善模型,模型正确率为90.00%(54/60),灵敏度为80.00%(24/30),特异性为100.00%(30/30),其特异性生物标记物为1239.21Da、1066.40Da、1215.27Da三个差异蛋白峰。在模型中1239.21Da、1215.27Da两个差异蛋白峰疗前高表达,疗后低表达;1066.40Da差异蛋白峰疗前低表达,疗后高表达。说明治疗组治疗前后的舌苔改善与这三个差异蛋白峰的变化密切相关,治疗后1239.21Da、1215.27Da蛋白峰低表达及1066.40Da蛋白峰高表达,可能导致舌苔的改变。   结论:1)脾虚湿热证特征性舌象为红舌、黄厚腻苔,胖大舌或齿痕舌或裂纹舌或多种舌形并见。2)健脾清胃方治疗慢性胃炎脾虚湿热证疗效明显。脾虚湿热证特征性舌象的改善与部分症状的改善密切相关。舌象尤其是舌苔较症状更灵敏反应体内脾虚湿热情况的改善。3)采用SELDI-TOF-MS技术对特征性舌象中舌苔进行检测,将正常组与治疗组治疗前比较,将治疗组治疗前、后比较,其结果均有差异,差异包括差异个数、表达趋势等方面。细分组结果可知疗后舌苔差异蛋白表达早于舌苔临床改善,苔色变化程度与差异蛋白峰数量有关。4)在差异蛋白结果基础上,进一步采用决策树方法,建立慢性胃炎脾虚湿热证特征性舌苔模型、慢性胃炎脾虚湿热证治疗前后舌苔改善模型,经检测两个模型正确率、灵敏度、特异性均较高。不同模型筛选出其相应的生物学标志物,对探讨舌苔形成及变化规律有一定意义。不同的特异性生物学标志物可分别作为慢性胃炎脾虚湿热证特征性舌苔的诊断指标、证治前后舌苔改善的疗效指标。
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