外源性巨噬细胞治疗小鼠继发性细菌性腹膜炎

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目的:1、研究细菌通过静脉和腹腔两种不同途径入侵对小鼠死亡的影响,证实细菌静脉入侵不使小鼠死亡,而腹腔入侵可使小鼠死亡,并探讨腹腔注射细菌的最佳浓度。2、研究腹腔注射外源性巨噬细胞对继发性细菌性腹膜炎小鼠转归的影响,探讨巨噬细胞对继发性细菌性腹膜炎小鼠的治疗作用,并与抗生素的治疗作用进行比较。  方法:1、将不同浓度大肠杆菌通过不同途径注射入小鼠体内,实验分为腹腔和静脉两大组,每大组再分为细菌浓度为1.0×107、2.0×106、4×106 CFU/ml三组及PBS液对照组,观察小鼠的体重变化、一般情况和死亡情况,得到可使50.0%小鼠死亡的腹腔注射的细菌浓度。2、利用转瓶培养技术将U937细胞激活使之成为巨噬细胞,将细菌和激活U937细胞同时注射入小鼠腹腔,实验分组为:细菌与细胞比例分别为2:1、2:5、1:5三组及细菌与PBS液对照组,观察小鼠的体重变化、一般情况和死亡情况,摸索出不引起腹膜炎小鼠死亡的巨噬细胞浓度。3、选用使50.0%小鼠死亡的大肠杆菌浓度、不引起腹膜炎小鼠死亡的激活U937细胞浓度及对大肠杆菌敏感的庆大霉素,实验分组为:细菌+PBS液对照组,细菌+激活U937细胞组,细菌+庆大霉素组,观察每组小鼠的体重变化、一般情况及死亡情况。  结果:1、细菌经静脉入侵不影响小鼠生长,一周内小鼠体重明显增加(P<0.05),注射前后小鼠一般情况无差异(P>0.05),且小鼠均无死亡。而细菌经腹腔入侵严重影响小鼠生长,一周内体重明显降低(P<0.05),一般情况均变差(P<0.05),细菌浓度为1.0×107、2.0×106、4×105 CFU/ml时小鼠死亡率分别为100.0%、50.0%、20.0%,得到腹腔注射细菌的最佳浓度为2.0×106CFU/ml。2、注射细菌和巨噬细胞的小鼠体重明显重于注射细菌和PBS液对照组(P<0.05),一般情况均比对照组好(P<0.05),且小鼠的死亡率均降低,细菌与细胞比例为2:1、2:5、1:5时,小鼠的死亡率分别为40.0%、20.0%、0。当细菌与细胞比例为1:5,巨噬细胞浓度为1.0×107/ml时,不引起小鼠死亡,对小鼠继发性细菌性腹膜炎有治疗作用。3、细菌与激活U937细胞或庆大霉素同时注射的小鼠体重明显重于注射细菌与PBS液的对照组(P<0.05),一般情况比对照组好(P<0.05),死亡率明显降低;此外激活U937细胞组小鼠体重明显重于庆大霉素组(P<0.05),一般情况比庆大霉素组好(P<0.05),注射细菌和激活U937细胞的小鼠无死亡,而注射细菌和庆大霉素的小鼠死亡率为20.0%。  结论:细菌经静脉入侵不使小鼠死亡,而经腹腔入侵可使小鼠死亡,且死亡率随细菌浓度增加而增加。腹腔注射外源性巨噬细胞对小鼠继发性细菌性腹膜炎有治疗作用,可能优于腹腔注射抗生素的治疗作用。
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