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目的：
胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，病死率高达29.31/10万，临床病例多以进展期为主[1]，淋巴结和腹腔内侵袭、转移是导致胃癌患者生存率低的主要原因。肿瘤的转移是一个涉及到肿瘤本身生物学行为和靶器官特性等多因素的复杂过程。
NF-κB活化受体因子(Receptor activator of NF-κB，RANK)是肿瘤坏死因子受体超家族（Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily，TNFRS）的成员。RANK最初从树突状细胞中克隆出来，以三聚体形式发挥作用，被发现和证实在溶骨过程以及淋巴结发育中有重要作用。人类RANK与CD40有高度同源性，属于Ⅰ类跨膜蛋白[2][3]。RANK广泛分布于骨骼肌、胸腺、肝、结肠、小肠、肾上腺、破骨细胞、乳腺上皮细胞、前列腺、胰腺[4][5]。
趋化因子及其受体信号通路在肿瘤细胞的转移中发挥重要作用。近年来研究发现，RANKL/RANK/OPG系统参与细胞存活、增殖和凋亡的调控，并与多种肿瘤的发生、发展和浸润转移有关[6]。RANK表达于乳腺癌、肺癌、前列腺癌、恶性黑色素瘤及肾细胞癌等，而细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)具有很强的趋化因子样作用。RANKL通常表达于成骨细胞/骨基质细胞，其受体RANK表达于破骨细胞表面，RANKL与RANK结合后，可促进破骨细胞的活化。并且RANKL可诱导RANK阳性肿瘤细胞的迁移和骨定向转移[7][8][9][10]。而RANK是否也表达于胃癌细胞，在国内外报道较少。RANK在胃癌中的表达，及其与临床病理因素和生存的相关性研究无相关报道。
本研究应用免疫组化SP法，检测RANK蛋白在胃癌中的表达情况，并分析其与胃癌临床病理特征的关系以及对生存的影响，旨在探讨RANK在胃癌中的表达及临床意义。
材料和方法：
一、组织标本
中国医科大学附属第一医院2006年4月至2011年12月手术切除的胃癌组织标本232例，术前未行放疗、化疗及免疫治疗。其中男性166例，女性66例。年龄29岁～80岁，中位年龄60岁。组织学类型均为腺癌，将印戒细胞癌、粘液细胞癌划入低分化腺癌组。按分化程度分为:中高分化癌110例，低分化癌100例，混合型22例。其中有淋巴结转移者180例，无淋巴结转移者52例，浸润深度根据美国癌症联合委员会(AJCC)第7版胃癌TNM分期标准，T12例，T218例，T338例，T4174例。
二、试剂
鼠抗人RANK单克隆抗体购自RD公司; SP检测试剂盒及DAB显色液均购自福州迈新生物技术开发有限公司。
三、方法
将232例胃癌标本制作成石蜡切片，采用免疫组化SP法，按照SP检测试剂盒说明书所示步骤进行。
四、免疫组化结果判断
RANK以胞膜和/或胞浆出现棕黄色颗粒为阳性染色，于显微镜400倍视野下随机选取5个有代表性的不同区域，每个视野的得分由阳性细胞的比例和显色强度两方面决定，依照阳性细胞比例:≤5％、6-25％、26-50％、51-75％、≥76％分别得0分、1分、2分、3分、4分;依照显色强度:未着色、浅黄色、棕黄色、棕褐色分别得0分、1分、2分、3分;将两项得分相乘得到该视野的最终得分，选取的5个视野得分的平均值为最后得分。最后该切片按照得分分为以下四个等级:0-1分为（-），2-4分为(+)，5-7分(++)，≥8分为(+++)。（-）～(+)为阴性表达，(++)～(+++)为阳性表达。
五、统计分析
以SPSS18.0软件进行统计分析，RANK的表达与临床病理因素之间的相关性分析采用Spearman等级相关性分析;RANK的表达与生存时间的关系采用Kaplan-Meier生存率曲线及Log-rank检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。
实验结果：
一、RANK的表达情况
在232例胃癌标本中有123例RANK高表达，阳性率为53％;亚组分析中，在91例肠型胃癌标本中有64例RANK高表达，阳性率为70.3％。
二、RANK的表达与临床及病理因素之间的关系
经相关性统计分析显示RANK的表达与性别、年龄、浸润深度、临床分期以及淋巴结转移等病理因素无显著相关性(P＞0.05);而RANK的表达与Lauren分型相关(P=0.001)。
在亚组分析中，RANK在胃癌肠型患者中，与性别、浸润深度、临床分期等病理因素无显著相关性(P＞0.05);与淋巴结转移度相关(P=0.032)，年龄相关(P=0.032)。
三、RANK的表达与生存的关系
随访开始时间为手术当日，截止时间为2012年6月，采用电话随访。232例患者全部完成了随访。RANK阳性组患者生存率为52.8％，阴性组患者生存率为58.7％，差异无统计学意义(P=0.306)。亚组分析中，肠型胃癌RANK阳性组患者生存率高于阴性组，分别为46.9％和74.1％，两者有统计学意义(P=0.016)。
结论：
1、RANK表达与性别、年龄、浸润深度、临床分期以及淋巴结转移等病理因素无显著相关性，与Lauren分型相关(P=0.001);在生存方面，RANK阳性的患者表现出生存劣势，无统计学差异(P=0.306)。
2、亚组分析中，肠型胃癌中，RANK表达与性别、浸润深度、临床分期以及淋巴结转移等病理因素无显著相关性，与年龄相关(P=0.032)，与淋巴结转移度相关(P=0.032);在生存方面，RANK阳性的患者表现出生存劣势，有统计学意义(P=0.016)。