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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，侵袭和转移是导致乳腺癌病人死亡率高居不下的重要因素。上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)在肿瘤侵袭转移过程中发挥至关重要的作用。microRNA-200家族（miR-200s）可通过抑制E型钙粘蛋白(E-cadherin)转录抑制子ZEB1和ZEB2的表达而阻止EMT。在许多肿瘤中，miR-200s由于启动子区高甲基化而表达沉默。我们先前研究发现三氧化二砷(AS2O3)可下调侵袭性乳腺癌细胞的基因组甲基化水平，但AS2O3能否通过脱甲基作用激活miR-200s，阻滞EMT，进而抑制侵袭性乳腺癌细胞的转移侵袭未见报道。 目的：采用乳腺癌细胞系（MDA-MB-231和BT-549）为体外研究模型，探讨AS2O3诱导miR-200c再表达的可能机制。为AS2O3日后用于临床治疗侵袭性乳腺癌侵袭转移提供理论依据。 方法：检测细胞转移侵袭能力:细胞划痕和Transwell实验;检测细胞EMT指标:细胞形态观察、RT-PCR及Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平;检测miR-200s表达:qRT-PCR检测;敲除及高表达miR-200c: anti-miR-200c或miR-200c-mimics转染;检测基因组甲基化水平:免疫荧光检测5-甲基胞嘧啶(5mC)表达;检测miR-200c启动子区甲基化水平:甲基化特异性PCR(MeDIP);观察处理对肿瘤组织miR-200s和EMT指标的影响:裸鼠皮下致瘤实验、qRT-PCR、Western blot和免疫组化实验。 结果：AS2O3处理侵袭性乳腺癌MDA-MB-231和BT-549细胞可抑制其划痕愈合及转移侵袭能力;AS2O3处理MDA-MB-231细胞可上调E-cadherin的mRNA(CDH1)和蛋白表达水平，并且下调N-cadherin和Vimentin表达水平，诱导细胞形态发生上皮样改变;AS2O3处理MDA-MB-231细胞可上调miR-200s表达水平，AS2O3处理BT-549细胞也可上调miR-200c表达水平;AS2O3处理的MDA-MB-231细胞中基因组整体甲基化水平下降，且AS2O3可通过下调miR-200c启动子区甲基化水平进而上调MDA-MB-231和BT-549细胞中miR-200c表达;在MDA-MB-231细胞中高表达miR-200c可上调E-cadherin的mRNA(CDH1)和蛋白表达水平;转染anti-miR-200c可阻滞AS2O3处理所致是MDA-MB-231细胞E-cadherin表达升高，削弱了细胞形态发生的间质-上皮样改变;同时，转染anti-miR-200c可阻滞AS2O3处理所致MDA-MB-231和BT-549细胞转移侵袭能力下降;将MDA-MB-231细胞接种至裸鼠皮下，待成瘤后AS2O3腹腔注射处理，结果发现与对照组肿瘤组织相比，AS2O3处理组可抑制肿瘤组织的生长，上调肿瘤组织中miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-429和E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平，下调N-cadherin和Vimentin的表达水平。 结论：AS2O3能抑制乳腺癌细胞的侵袭转移能力，RT-PCR结果显示AS2O3在乳腺癌细胞中可以明显抑制CDH1的表达;Westem blot实验检测显示，AS2O3能够明显上调上皮钙黏蛋白E-cadherin的表达、同时下调间质蛋白N-cadherin和Vimentin的表达水平。提示AS2O3能够抑制乳腺癌的上皮-间质转化。免疫荧光实验显示AS2O3可以引起MDA-MB-231乳腺癌细胞基因组脱甲基化。甲基供体SAM可以减少AS2O3引起的miR-200c的脱甲基的程度。Transwell实验显示，AS2O3可以通过脱甲基上调miR-200c的表达从而抑制侵袭性乳腺癌细胞发生侵袭转移。提示AS2O3是通过miR-200c启动子区脱甲基而抑制上皮-间质转化，从而抑制了乳腺癌细胞的侵袭转移。