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本文主要从以下几方面进行论述: 第一部分 中医和中西医结合治疗儿童注意力缺陷多动障碍的系统评价 中医在辨证治疗儿童ADHD方面有其自身的疗效优势,并且不良反应发生较少、程度较轻。但通过研究相关中医治疗儿童ADHD的随机对照临床试验的文献可知,不少中医治疗儿童ADHD的文献存在诊疗评估标准不统一,实施方法不严谨等问题。故有必要对中医和中西医治疗儿童ADHD的随机对照试验进行系统评价。 目的: 对中医和中西医结合治疗儿童ADHD随机对照试验的临床疗效和不良反应进行系统评价,旨在为中医治疗儿童ADHD方面提供相关研究治疗证据质量的评级,客观提出现阶段中医治疗儿童ADHD中临床试验研究的问题,为今后相关的中医治疗儿童ADHD研究设计提供合理的建议,以期能指导临床实践,提高临床疗效。 方法: 1.采用计算机数据库和手工检索的方式进行文献检索并导入Endnote X7软件。 2.按照制定的纳入和排除标准筛选文献,提取纳入文献的相关数据。 3.应用改良Jadad量表进行质量评价。 4.使用Cochrane系统评价的偏倚风险评估工具进行偏倚风险的评价。 5.使用RevMan5.2软件对相关数据进行Meta-分析。 6.使用GRADEprofiler3.6软件,进行证据质量的评价和推荐强度的评级。 7.对纳入的文献中报道的不良反应进行描述性分析。 8.进行综合分析和讨论,得出结论。 结果: 1.纳入符合标准的文献:共48篇,病例总数为4374例。 2.改良Jadad量表评分:4分文献为1篇,3分文献为5篇,2分文献为23篇,1分文献为19篇。 3.Meta-分析的异质性检验提示:中医/中西医结合治疗儿童ADHD与西医(利他林对照)治疗儿童ADHD在临床疗效的总有效率、中医临床症候疗效的总有效率方面比较,差异有统计学意义。中西医结合治疗儿童ADHD与中医治疗儿童ADHD在临床疗效的总有效率方面比较,差异有统计学意义。 4.GRADE标准质量分级分析提示: 4.1中医治疗儿童ADHD临床疗效的分析证据质量等级为中级证据; 4.2中西医结合治疗儿童ADHD临床疗效的分析证据质量等级为低级证据; 4.3中西医结合治疗儿童ADHD与中医治疗儿童ADHD临床疗效比较的分析证据质量等级为极低级证据; 4.4中医/中西医结合治疗儿童ADHD中医证候疗效的分析证据质量等级为低级证据。 5.不良反应情况分析提示:中医或中西医结合治疗儿童ADHD在不良反应发生情况和程度上较单纯西医治疗轻。 结论: 1.中医或中西医结合治疗儿童ADHD可以提高临床总有效率。 2.中医和中西医结合治疗儿童ADHD与单纯西药常规治疗儿童ADHD比较,还能够减少与减轻不良反应的发生情况。 3.本研究纳入的样本质量不高,故在今后的中医和中西医结合治疗儿童ADHD临床试验研究方面应该加强规范性与准确性的研究设计,特别是需要大样本含量、多中心、随机对照、双盲的文献研究进一步证实以增强本研究结论的证据质量。 第二部分 儿童注意力缺陷多动障碍的中医证治规律研究 对于儿童注意力缺陷多动障碍的治疗中医方面积累了丰富的临床经验,故临床治疗效果显著且不良反应较少见。 目的: 本研究拟通过对中医治疗儿童ADHD的相关中医临床试验的研究文献进行整理,以分析当前儿童ADHD的证型特点和临床中药的应用规律,从而更好的总结中医治疗儿童ADHD的中医治法和治则规律。 方法: 1.采用计算机数据库和手工检索的方式进行文献检索并导入Endnote X7软件。 2.按照制定的纳入和排除标准筛选文献,提取纳入文献的相关数据。 3.使用Excel2007软件进行数据录入和统计分析; 4.进行分析,最后得出结论。 结果: 1.儿童ADHD的证型分布结果提示:肝肾阴虚证型、肾虚肝旺证型和心肾不交证型是儿童ADHD的主要发病证型。 2.儿童ADHD的证候要素结果提示:儿童ADHD的虚性病机要素中阴虚、内火是最常见的病因病机,而因实性病机导致儿童ADHD的发病情况较不常见。ADHD的病位主要在肝、肾二脏,其次是心、脾、脑三脏。 3.治疗方剂结果提示:补益剂和安神剂是治疗儿童ADHD的常用方剂类型,其中古代经典成方化裁临床使用较多的为天麻钩藤饮、六味地黄丸,现代中成方临床使用较多的为静灵口服液、益智宁神颗粒。 4.单味中药结果提示:补虚药、安神药、清热药、平肝熄风药等是治疗儿童ADHD的常用药物:补虚药的具体常用代表药物有熟地黄、龟甲、白芍、山药和当归等;安神药的具体常用代表药物有远志、龙骨、酸枣仁、柏子仁和夜交藤等;清热药的具体常用代表药物有生地黄、牡丹皮、黄连、知母和黄柏等;平肝熄风药的具体常用代表药物有牡蛎、钩藤、珍珠母、天麻和石决明等。 5.单味中药归经结果提示:肝经、肾经、心经是治疗儿童ADHD常用中药的常见药物归经。 结论: 中医药在治疗儿童ADHD的优势之一是通过应用中药方剂等方法,调节儿童的脏腑功能和阴阳平衡。今后应该进一步巩固和发展这一优势,并对中医诊疗儿童ADHD的规范性方面进行更深入的研究以形成可广泛应用于临床的标准。 第三部分 钩藤碱调节多巴胺转运体基因敲除大鼠前额叶皮层多巴胺能神经元细胞分泌功能研究 很多中枢神经系统障碍性疾病的发病原因与大脑前额叶皮层功能受损密切相关,即由大脑前额叶皮层区神经递质系统(如多巴胺系统和去甲肾上腺素系统)活动功能的紊乱引起冲动性症状的发生和发展。而相关方面的西药如普拉克索、硫必利和氟哌啶醇等,可调节多巴胺的代谢功能,从而达到治疗相应的中枢神经系统障碍性疾病。课题组前期临床研究表明,以钩藤为君药的宁动中药复方制剂可调节大鼠脑内的多巴胺和高香草酸的代谢。 目的: 观察钩藤碱对多巴胺系统的代谢以进一步阐明钩藤碱对前额叶皮层的作用机制。 方法: 1.研究对象:刚出生的Wistar大鼠7只纳入正常空白对照组(Norm Crt),刚出生的DAT KO大鼠48只随机分为6组,分别为钩藤碱高浓度组(Rhy High)、钩藤碱低浓度组(Rhy Low)、普拉克索组(Ppx)、硫必利组(Tia)、氟哌啶醇组(Hal)和DAT空白对照组(DAT Crt),每组各8只;分别进行断头处死以备制神经元细胞进行原代培养。 2.加药和收集检测上清:原代神经元细胞培养48h后开始进行加药,Rhy High组加入钩藤碱高浓度标准品溶液(0.4μmol/ml,50μl);Rhy Low组、Ppx组、Tia组和Hal组分别加入钩藤碱低浓度标准品溶液、Ppx溶液、Tia溶液、Hal溶液(0.1μmol/ml,50μl); DAT Ctr组和Norm Ctr组为空白对照组,不予加药。给药后按照48h、24h、6h、3h这四个时间点进行上清液的收集。 3.研究内容:通过实验酶联免疫吸附法,定量检测其多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)、脑源性营养因子(BDNF)、单胺氧化酶(MAO)、5-羟基色氨(5-HT)和5-吲哚乙酸(5-HIAA)的含量,通过免疫荧光双标法观察该区的酪氨酸羟化酶(TH)的表达。 结果: 1.Rhy High组可明显增加DAT KO大鼠PFC区的DA和BDNF的含量,而5-HT和5-HIAA的含量仅有轻微的上升。 2.Rhy Low组有降低DAT KO大鼠PFC区DA含量的趋势,而增加了HVA的含量,5-HT和5-HIAA的含量仅有轻微的上升。同时,Rhy High组和Rhy Low组都可以明显增加BDNF的含量,但对MAO的含量基本不存在明显变化。 3.免疫荧光双标法显示:Rhy High组神经元细胞的黄绿色荧光较强,与NormCtr组的荧光强度较为接近;Rhy Low组神经元细胞的黄绿色荧光稍强于DAT Ctrl组的黄绿色荧光,而较Norm Ctr组的黄绿色荧光则明显减弱。 结论: 钩藤碱对大脑PFC的DA代谢可能具有双向调节的功能,又能够增强BDNF的含量,还对5-HT和5-HIAA的调节具有一定的影响,可以用于研究因大脑前额叶皮层的DA异常代谢导致的相关中枢神经系统疾病和保护神经元的正常功能。