【摘 要】
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骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是目前发现的唯一能够诱导异位成骨的一类生长因子.从骨组织提纯的BMP及基因工程生产的BMP均具有良好的诱导成骨的作用,可以
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骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是目前发现的唯一能够诱导异位成骨的一类生长因子.从骨组织提纯的BMP及基因工程生产的BMP均具有良好的诱导成骨的作用,可以诱导间充质细胞定向分化为成骨细胞系.该实验采用基因工程的原理和方法,拟从基因治疗的角度来发挥BMP2的诱导成骨作用.通过逆转录病毒表达系统-PLXSN,我们成功地构建了BMP2的逆转录病毒表达系统-PLXSN/BMP2,并用PT67细胞包装出含BMP2基因的复制缺陷的重组逆转录病毒,我们又通过该病毒将BMP2基因导入小鼠骨髓基质细胞和小鼠骨髓基质细胞系-QXMSC,经Northern和Western分析证实导入的BMP2得到有效的表达,表达的BMP2能够诱导这两种细胞分化为成骨细胞.通过腺病毒表达系统-Adeno-X DNA,我们成功地构建了人BMP2的腺病毒表达系统-Adeno/BMP2,并用HEK293细胞包装出含人BMP2基因的复制缺陷的重组腺病毒,我们又通过该病毒将BMP2基因导入小鼠骨髓基质细胞,经RT-PCR和Western分析证实导入的BMP2得到有效的表达,表达的BMP2能够诱导小鼠骨髓基质细胞分化为成骨细胞.腺病毒表达系统表达系统滴度高,能够同时感染分裂和静止期细胞,非常适宜于骨缺损的局部基因治疗.我们成功地构建了含人BMP2基因的复制缺陷的重组腺病毒,为进一步的体内实验和临床应用打下了良好的基础.
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