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五指毛桃(Radix fici hirtae),是我国重要的传统药材之一,以桑科榕属植物粗叶榕的根入药,有健脾补肺、利湿舒筋之功效,用于脾虚浮肿、食少无力、肺痨咳嗽、盗汗、风湿痹痛、产后无乳等症。此外,五指毛桃又是一食药同源的植物,在我国南方,五指毛桃常被用作传统的饮食汤剂。近年来,五指毛桃这一宝贵的植物资源引起了药学工作者的高度重视,对其化学成分、药理活性及其他方面的研究不断深入,并证实补骨脂素和佛手内酯为五指毛桃的主要活性成分,具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制肿瘤、免疫调节等作用。本部分的主要研究内容如下:
1.建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MSn)法确定五指毛桃指纹图谱的方法。采用HypersilC18柱,水(A)-甲醇(B)溶液为流动相,梯度程序洗脱。并对其方法学进行了考证。四个产地的五指毛桃样品分离得到16个“共有峰”,经质谱鉴定出10种成分。通过样品“共有峰”含量及其特征峰,可用于评价不同产地的五指毛桃的优劣,并为五指毛桃药材的质量控制标准提供了参考依据。
2.五指毛桃中的主要活性成分-补骨脂素和佛手内酯的定量分析。采用C18柱,以水-甲醇。(50:50,v/v)溶液为流动相,流速0.80mL/min,检测波长300nm(PDA)；结果显示补骨脂素和佛手内酯分别在11μg/L-220mg/L和10μg/L-200μg/L范围内呈现良好的线性关系,线性系数均为0.9999；精密度分别为2.34％和2.76％；稳定性的RSD分别为2.11％和1.67％；重现性的RSD分别为1.53％和1.80％；回收率分别为101.94％和100.78％。从样品含量测定结果看,河源产地的药材中两种活性成分的含量均高于其他产地,与已往报道文献一致。
3.采用液-液微萃取对五指毛桃水提取液进行前处理,并结合高效液相色谱进行分析。研究优化了液-液微萃取条件,并对其影响因素进行了探讨。在优化的条件下,补骨脂素和佛手内酯分别在0.55μg/L-2.20mg/L和1.00μg/L-4.00mg/L范围内,呈现良好的线性关系,相关系数分别为0.9999和0.9992；精密度、稳定性、重现性和相对回收率的相对标准偏差(RSD)均小于3％。相对回收率分别为99.67％和100.80％,检测限分别为0.13和0.18μg/L(S/N=3)。该方法首次对五指毛桃水提物中的活性成分进行研究,采用液.液微萃取前处理方法进行富集,为五指毛桃中药汤剂中有效成分的直接测定提供了依据。