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本文目的为研究四肽化合物CMS030对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用，并初步探讨其是否通过抑制滑膜细胞、血管内皮细胞的增殖及炎症因子的分泌、黏附因子的表达等机制发挥作用，为此四肽化合物的临床应用奠定实验基础。
首先，应用MTT比色法观察CMS030对体外培养人淋巴细胞增殖的抑制作用；并通过测定细胞培养上清IFN γ水平，观察其对T淋巴细胞功能的影响，进一步证实CMS030免疫抑制作用。其次，建立大鼠佐剂性关节炎(AA)动物模型；测量各组大鼠的踝关节周长，观察CMS030对AA大鼠原发性及继发性踝关节肿胀的抑制作用；HE染色观察CMS030对AA大鼠踝关节病理改变的抑制作用；MTT比色法观察CMS030对AA大鼠T淋巴细胞增殖的抑制作用。再次，建立类风湿性关节炎病人滑膜细胞体外原代培养的体系，用MTlT比色法观察CMS030对滑膜细胞增殖的抑制作用；ELISA法测定细胞培养上清中IL-1β、TNF-α和VEGF水平，观察CMS030对滑膜细胞分泌细胞因子的影响。最后，建立人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)体外原代培养的体系，MTT比色法观察CMS030对HUVEC增殖的抑制作用；cell-ELISA 法观察CMS030对HUVEC表面表达粘附分子ICAM-1 和 VCAM-1的抑制作用。
实验结果显示：CMS030 在体外给药剂量为0.01～100μg/ml 之间均能抑制PHA 诱导的 T 淋巴细胞增殖反应，抑制率为24.0％～45.7％， CMS030(0.01～100μg/ml)作用48小时能抑制T淋巴细胞分泌 IFNγ，抑制率分别为14.4％，19.8％，27.4％，32.3％，45.4％，与对照组相比，有显著性差异 (P<0.01)。CMS030 给药剂量为 2μg/kg/d～20μg/kg/d，腹腔注射给药8天后，可以减轻AA大鼠致炎侧及对侧踝关节肿胀，与生理盐水组比较，有显著性差异(P<0.05)。CMS030 能抑制AA大鼠T淋巴细胞转化功能，与生理盐水组比较，有显著性差异(P<0.05)。病理结果显示CMS030能改善踝关节的滑膜增生，炎细胞浸润及血管形成，减轻软骨的破坏。CMS030在体外给药剂量为1～100μg/ml时能明显滑膜细胞的增殖(P<0.05或P<0.01)，最高抑制率达33.6％；CMS030 给体外药剂量为 0.1～10μg/ml能抑制人滑膜细胞LPS诱导的IL-1β和TNF-α分泌水平，并呈药物剂量依赖性； CMS030给体外药剂量为1～100μg/ml能抑制人滑膜细胞基础的及TNF-α诱导的VEGF分泌(P<0.05)，但对IL-1β诱导的人滑膜细胞分泌 VEGF无明显抑制作用(P>0.05)。CMS030在给体外给药剂量为0.1～100μg/ml时，能明显抑制VEGF诱导的HUVEC增殖(P<0.05或P<0.01)；CMS030 体外给药剂量为1～100μtg/ml时，能明显抑制TNF-α诱导的HUVEC 表达粘附分子ICAM-1(P<0.05，P<0.01)，CMS030 给药剂量为100μg/ml 时，能明显抑制TNF-α诱导的HUVEC表达粘附分子 VCAM-1(P<0.01)。
从上述结果我们得出结论如下：CMS030能抑制AA大鼠的原发性及继发性踝关节肿胀，改善关节的病理改变，其抗类风湿性关节炎的作用机制可能是通过抑制T淋巴细胞活化，抗炎(抑制IL-1β、TNF-α的分泌及ICAM-1、VCAM-1的表达)，抗增殖(抑制人滑膜细胞的增殖)及抑制血管形成(抑制HUVEC增殖，抑制VEGF的分泌)来发挥作用。