【摘 要】
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IL-18是一种新型细胞免疫调节因子,主要由激活的巨噬细胞产生,在体内分布广作用呈多样化、能诱导多种细胞因子产生、上调Fas配体的表达、介导T细胞及NK细胞的细胞毒活性、
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IL-18是一种新型细胞免疫调节因子,主要由激活的巨噬细胞产生,在体内分布广作用呈多样化、能诱导多种细胞因子产生、上调Fas配体的表达、介导T细胞及NK细胞的细胞毒活性、增强机体抗肿瘤机能,既能提高特异性免疫又能提高非特异性免疫。
本研究内容包括两部分,一是克隆广东水鸭IL-18基因并构建鸭IL-18基因的重组原核和真核表达质粒。二是在无现有鹅IL-18基因序列可参考的情况下,探讨运用RACE方法扩增鹅IL-18基因,为克隆鹅IL-18基因奠定基础。
通过对鸡、鸭白介素18的序列进行分析,找出保守序列,先设计一对特异引物,以RT-PCR方法扩增、克隆广东马江杂交鹅IL-18基因的中间序列,依据获得的中间序列设计引物,运用3’RACE技术扩增、克隆、拼接、延伸广东马江杂交鹅IL-183’端的序列,结果获得了广东马江杂交鹅IL-183’端474bp的序列片段,为继续克隆完成鹅IL-18基因全序列探索了新途径并奠定了基础。
本研究通过对广东水鸭的IL-18基因的克隆、测序、构建原核和真核重组质粒及对原核重组表达质粒在大肠杆菌M15中的诱导表达,为进一步研究重组鸭IL-18的生物学特性及分子佐剂的应用奠定了良好的基础。
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