论文部分内容阅读
本工作利用实验生态学、毒理学和分子生物学等实验室方法,从种群水平、细胞水平、蛋白质水平和分子水平探讨了渔药呋喃西林对海洋纤毛虫的生态毒性效应。本研究主要内容和成果包括:
1)通过急、慢性毒性实验,测定了呋喃西林对三种海洋纤毛虫--扇形游仆虫(Euplotes vannus)、红色伪角毛虫(Pseudokeronopsis rubra)和寡毛双眉虫(Diophrys oligothrix)的48h 半致死浓度(LC50)分别为 78.61 mg.L-1,63.53mg-L-1和35.81 mg·L-1,120h 半抑制浓度(IC50)分别为5.78 mg·L-1,7.66 mg·L-1和7.76 mg·L-1,表明药物具有抑制受试纤毛虫的生长或繁殖及杀灭作用,且纤毛虫物对药物的耐受性存在种间差异;
2)透射电镜下观察结果表明:呋喃西林暴露(6mg·L-1,15 mg·L-1,25 mg·L-1)对游仆虫的影响主要表现在线粒体结构破坏,溶酶体数量增多,出现空泡化,细胞器解体,细胞膜游离、皱缩,部分细胞器死亡、解体,证明呋喃西林暴露可对扇形游仆虫的细胞器造成损伤;
3)呋喃西林处理后(6 mg·L-1,15 mg·L-1,25 mg·L-1),扇形游仆虫过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活力发生显著变化,两种酶活力均显著高于对照组;
4)应用随机引物扩增多态 DNA(RAPD)技术扩增了呋喃西林处理组(6mg·L-1,15 mg·L-1,25 mg·L-1)和对照组扇形游仆虫的基因组 DNA,产生的RAPD图谱说明处理组与对照组的DNA片段在数量、大小和强度上均存在实质性差异。处理组丢失的条带数目显示了浓度-时间依赖关系:呋喃西林处理24小时后,15mg·L-1浓度处理组消失的条带数目较少,而 25 mg·L-1处理组消失的条带数目比较高;处理72小时后,消失条带的数目随着呋喃西林浓度的提高而增多;到96小时后,两个低浓度处理组(6 mg·L-1和15 mg·L-1)的消失条带数目随时间的增长而增多。结果表明呋喃西林处理对扇形游仆虫有显著的致 DNA 损伤作用。