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目的: 中药复方PC-SPES由菊花、灵芝、甘草、大青叶、三七、冬凌草、黄芩和棕榈子八味药组成。PC-SPES体内外均有显著的抗前列腺癌活性，但因其化学成分复杂，作用机制不明，于2002年撤出美国市场。因此为了寻找PC-SPES的药效物质基础，阐明其作用机制，本课题组前期筛选了PC-SPES中各味药的有效成分，发现异甘草素（isoliquiritigenin，ISL）对前列腺癌细胞LNCaP有显著的抑制作用。在此基础上，本研究进一步考察ISL对前列腺癌细胞PC-3、22RV1的体外作用，及其对PC-3裸鼠移植瘤的体内药效;基于mRNA芯片表达谱数据，研究ISL阻滞前列腺癌细胞PC-3、22RV1细胞周期的作用机制，以及ISL对前列腺癌细胞LNCaP、22RV1中甾体激素代谢通路中相关酶表达的影响;进而从多靶点触控的角度，探讨ISL抑制前列腺癌细胞生长可能的作用机制。 方法: 1.采用MTT法检测ISL对前列腺癌细胞生长活力的影响;采用前列腺癌裸鼠移植瘤的模型，考察ISL对前列腺癌的体内药效。 2.流式细胞仪检测ISL对前列腺癌细胞PC-3、22RV1细胞周期及凋亡的影响，分析mRNA芯片表达谱检测结果，筛选差异基因;采用qRT-PCR及WesternBlotting考察ISL对前列腺癌细胞PC-3、22RV1细胞周期相关信号分子CDK1、CyclinB1、14-3-3σ、Gadd45a及CDC25B表达的影响;采用Western Blotting和免疫组织化学法检测肿瘤组织样本中Cleaved Caspase3、CDK1、CyclinB1的蛋白表达。 3.采用qRT-PCR验证、考察ISL对前列腺癌细胞LNCaP、22RV1中甾体激素代谢通路中相关酶mRNA表达的影响;通过流式细胞仪及Western Blotting检测ISL对AKR1C2的蛋白表达的影响。 结果: 1.ISL能抑制前列腺癌细胞PC-3、22RV1的生长活力，IC50值分别为19.59μM、36.6μM; ISL能减小瘤体积，减轻瘤重，抑制前列腺癌PC-3裸鼠移植瘤的生长。 2.ISL能将前列腺癌细胞PC-3、22RV1细胞周期阻滞于G2/M期并诱导细胞凋亡;ISL能调控周期相关信号分子CDK1、CyclinB1、14-3-3σ、Gadd45a、CDC25B及凋亡相关信号分子Bcl-2、Bax的表达。 3.ISL能上调前列腺癌细胞LNCaP、22RV1中醛酮还原酶AKR1C1-C3，AKR1B1，AKR1B10，AKR1B15的表达;下调甾体激素代谢相关酶SRD5A1，CYP3A5以及雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原(PSA)的表达。其中ISL对LNCaP、22RV1细胞中AKR1C2的上调倍数可达48.81倍、28.61倍。 结论: 1.ISL有显著抑制前列腺癌细胞PC-3、22RV1增殖的作用，其机制可能与ISL下调细胞周期相关信号分子CDK1及其磷酸化水平有关，使细胞阻滞于G2/M期并最终导致细胞凋亡。 2.ISL抑制前列腺癌细胞LNCaP、22RV1增殖的作用可能与调控甾体激素代谢相关酶的表达，影响雄激素表达水平，从而降低AR的表达及活性有关。 3.ISL是一个可以通过多靶点触控抑制前列腺癌的天然小分子化合物。