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植物内生真菌的多样性十分丰富,近年来越来越被重视。对具有药用价值的植物进行内生真菌研究更成为关注的热点。核桃作为世界上广泛种植的树种之一,核桃青皮、根提取物具有抗癌、杀菌、杀虫等功效,核桃叶提取物具有解毒、止痒等作用,说明核桃具有很好的药用价值。因此,选择核桃进行内生真菌研究对微生物源农药的开发与利用具有重要的意义。本研究以陕西山阳县(秦岭南麓)、蓝田县(秦岭北麓)、宜君县(渭北旱塬)三个不同气候带的健康核桃树的不同组织器官为供试材料,采用组织分离法分离核桃内生真菌,并加以纯化和保存。采用真菌经典分类鉴定方法和分子生物学方法相结合进行核桃内生真菌的分类、鉴定,并进行了抑菌活性研究,结果如下:1.试验共分离获得内生真菌1450株,经形态学特性和真菌5.8Sr DNA-ITS分析,鉴定内生真菌归为47个属。其中链格孢属Alternaria为优势类群,占菌株总数的20.00%,镰孢属Fusarium和酵母属Saccharomyces相对较多,分别占菌株总数的8.34%和8.14%。2.对分离的核桃内生真菌进行物种多样性分析,结果发现,菌群组成存在部位、生境、季节的差异性和规律性。具体表现为:两年生茎中的内生真菌分离频率最高,为29.03%;一年生茎次之,为27.03%;其余依次为干茎(14.90%)>根(14.76%)>叶(8.83%)>果(5.45%)。3.从核桃两年生茎中分离出421株内生真菌,分属于25属,其内生真菌多样性指数和均匀度最高,分别为1.15和0.36;核桃果中分离到内生真菌79株,分别属于13属,其多样性指数和均匀度最低,分别为0.27和0.11。不同生境核桃内生真菌的分离频率、多样性指数(H’)和均匀度(E)存在差异,山阳的分离频率最高,分别为39.52%、1.42和0.42,宜君的次之,分别为33.03%、1.25和0.39,蓝田的最低,分别为27.45%、1.15和0.34。就季节而言,秋季的(53.79%、1.92和0.54)均高于冬季的(46.21%、1.56和0.47)。4.各菌群在核桃不同部位、生境和季节之间均具有一定的相似性。一年生茎和两年生茎中内生真菌的相似性系数最高(0.7755),根和干茎中内生真菌的相似性系数最低(0.3333);不同生境的核桃内生真菌相似性系数均在0.500以上,其中蓝田和宜君的相似性较高,Sorenson指数为0.6415;秋季和冬季核桃内生真菌的菌群具有一定的相似性,两者之间的Sorenson指数为0.5714。5.供试的176株核桃内生真菌对6种病原菌均具有不同程度的抑菌作用。抑制率在75%以上的菌株占菌株总数的19.9%;总体而言,对油菜菌核、辣椒疫霉的抑制效果较好,大多在50%以上。其中6个内生菌株LT7、LT11、DLT3、YJ2、YJ9、YJ17对6种病原菌的抑制效果普遍较好。菌株LT7对6种植物病原菌的抑菌活性均在80%以上,菌株T11、DLT3、YJ2、YJ9和YJ17分别对至少3种病原菌抑制活性在75%以上,说明核桃内生真菌LT7、LT11、DLT3、YJ2、YJ9、YJ17菌株具有较广的抑菌谱。