【摘 要】
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外植体通过诱导经历脱分化和再分化,最后大致有三种去处:诱导出畸形苗,死亡和诱导出正常植株.已经有报道微丝及肌动蛋白mRNA与动植物的发育有关.因此我们以愈伤组织作为研究
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外植体通过诱导经历脱分化和再分化,最后大致有三种去处:诱导出畸形苗,死亡和诱导出正常植株.已经有报道微丝及肌动蛋白mRNA与动植物的发育有关.因此我们以愈伤组织作为研究植物发育的材料,观察微丝及肌动蛋白mRNA在愈伤组织发育过程中的变化.该研究选取正常棉花的根,已经培养了长时间不能分化出正常植株的棉花愈伤组织和棉花畸形苗为材料,采用石蜡切片,通过FITC-鬼笔环肽对材料微丝荧光染色,结合荧光显微镜观察.我们发现在根原分生组织,原形成层和基本分生组织细胞中含有丰富的微丝,微丝呈网状分布;在愈伤组织细胞中微丝含量少;在畸形苗细胞中含有少量的微丝.因此推测,微丝在细胞中的这种分布可能与愈伤组织不能继续诱导出正常的植株而诱导出畸形苗有关.在豌豆肌动蛋白基因编码区上切取同棉花肌动蛋白基因编码区同源性为82﹪的一段序列为模板,进行地高辛标记合成RNA探针,通过RNA原位杂交技术对材料进行标记.结果表明:在根原形成层细胞的细胞质中浓度高,在伸长方向两端的细胞周边的胞质中mRNA浓度高子左右两侧细胞周边的胞质中mRNA浓度;根基本分生组织细胞中,在细胞核周边的胞质中mRNA浓度高,而细胞周边的胞质中mRNA浓度低;在细胞周边的胞质中mRNA分布是不均一的,细胞伸长方向两端的mRNA浓度比两侧高;在愈伤组织分生组织细胞中,在细胞核周边的胞质中mRNA浓度低;在细胞周边的胞质中浓度高并且分布不均匀;愈伤组织薄壁细胞中,在细胞核周边和细胞周边的胞质中mRNA含量都很低;在细胞周边的胞质区域,一些区域弱,甚至一些区域没有信号.这表明,从棉花愈伤组织薄壁细胞到鸟巢状管胞团再到正常苗的过程中肌动蛋白mRNA的分布和浓度都有明显的变化,而在这里愈伤组织在分化到鸟巢状管胞团后就不再继续发育,因而推测,肌动蛋白mRNA分布和浓度可能影响愈伤组织分化出正常的植株.
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