【摘 要】
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为了适应各种环境，植物演化出了发达的信号转导系统，感应及传递外界信号并及时做出相应的响应。Ca2+是可以将感应到的外界信号在体内进行传导的第二信使，在真核生物的信号转导途
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为了适应各种环境，植物演化出了发达的信号转导系统，感应及传递外界信号并及时做出相应的响应。Ca2+是可以将感应到的外界信号在体内进行传导的第二信使，在真核生物的信号转导途径中发挥重要的作用。CBL（Calcineurin B-Like,类钙调磷酸酶B蛋白)作为植物特异的Ca2+传感器，与CIPK（CBL-interacting protein kinase, CBL互作蛋白激酶）二者都是植物在非生物逆境胁迫下Ca2+信号转导中的重要组分。过去对CBL和CIPK基因家族的研究，主要集中在拟南芥、水稻等模式植物上。而在与小麦亲缘关系较近的模式植物二穗短柄草中的系统研究，迄今还未见报道。 本研究以二穗短柄草为材料，在鉴定CBL和CIPK基因家族成员的基础上，采用半定量 RT-PCR的方法，分析了在不同组织中和逆境胁迫及相关信号分子处理下CBLs和CIPKs的基因表达谱；并进行了基因克隆，成功构建了酵母表达载体。取得的主要研究结果如下： （1）以拟南芥的CBL和CIPK序列为模板，在Phytozome数据库中搜索二穗短柄草的CBL和CIPK序列，鉴定出11个CBLs和35个CIPKs，并对9个CBL基因和32个CIPK进行了比较深入的生物信息学分析。 （2）通过半定量RT-PCR技术，检测了CBL和CIPK基因在渗透、低温和高盐非生物逆境胁迫及相关分子信号ABA、乙烯和双氧水处理下的表达情况。结果发现，CBLs和CIPKs的基因表达对上述部分处理能够发生响应，但表达变化程度存在差异。 （3）并以获得的序列为基础设计特异引物，克隆得到7个 CBL基因和8个CIPK基因的全长ORF序列。 （4）构建CBL和CIPK基因酵母表达载体pGBKT7-BdCIPKs，与pGADT7-BdCBLs，为下一步进行酵母双杂交做好准备。 本文研究结果为运用酵母双杂交等技术，深入研究二穗短柄草CBLs和CIPKs在响应非生物逆境胁迫中的作用奠定了基础。
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