【摘 要】
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分子识别被定义为不同分子间通过分子间作用力特异性相互识别、结合的过程。分子识别技术常用于设计高效、灵敏的生物传感平台,其中有适配体传感器与分子印迹传感器。本论文构建了适配体荧光传感器及分子印迹荧光传感器用于对不同目标物的特异性检测。通过选择前列腺特异性抗原作为研究对象,开发适配体荧光传感器对其进行高效、灵敏的定量检测,最终实现对人血清样品中前列腺特异性抗原的检测。同时,利用分子印迹聚合物的特异性选
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分子识别被定义为不同分子间通过分子间作用力特异性相互识别、结合的过程。分子识别技术常用于设计高效、灵敏的生物传感平台,其中有适配体传感器与分子印迹传感器。本论文构建了适配体荧光传感器及分子印迹荧光传感器用于对不同目标物的特异性检测。通过选择前列腺特异性抗原作为研究对象,开发适配体荧光传感器对其进行高效、灵敏的定量检测,最终实现对人血清样品中前列腺特异性抗原的检测。同时,利用分子印迹聚合物的特异性选择性,制备了荧光分子印迹聚合物用于土霉素的检测,并应用于实际药品和环境样品中土霉素含量的快速、灵敏、准确的检测。此外,文中创新性地合成了具有适配体和分子印迹聚合物的适配体分子印迹聚合物,并将其用于四环素的双识别检测。具体开展的研究工作如下:（1）使用少层碳化钒（FL-V2CTx）作为猝灭剂,建立了前列腺特异性抗原（PSA）的荧光适配体传感器。多层V2CTx（ML-V2CTx）在四甲基氢氧化铵的作用下分层,制备FL-V2CTx。羧基化石墨烯量子点（CGQDs）与氨基化PSA适配体通过缩合反应结合,制备适配体和CGQDs的荧光复合物（aptamer-CGQDs）。以FL-V2CTx为猝灭剂,构建基于aptamer-CGQDs的荧光传感器应用于PSA的检测,检测线性范围为0.1～20 ng m L-1,检测限为0.03 ng m L-1。FL-V2CTx为猝灭剂的荧光响应分别是ML-V2CTx、少层碳化钛、多层碳化钛和氧化石墨烯（GO）的5.6、3.7、7.7和5.4倍。使用该荧光适配体传感器测定人血清样品中的PSA,其结果与医院使用的化学发光免疫分析的结果一致。这表明该荧光适配体传感器具有一定的临床应用前景。（2）以1-芘丁酸为原料合成了N-丙烯酰-1-芘丁基胺（Py-Alkenyl单体）,并以土霉素（OTC）为模版分子、Py-Alkenyl为功能单体,在交联剂和引发剂的作用下制备了芘分子印迹聚合物（Py-FMIP）。采用扫描电镜、透射电镜等方法对Py-FMIP进行表征。基于Py-FMIP构建了一种高灵敏度检测OTC的分子印迹荧光传感器。由于OTC与Py-FMIP之间存在的内滤效应,使得OTC能有效猝灭Py-FMIP的荧光。本文对p H值、猝灭时间等条件进行了优化,所制备的Py-FMIP传感器在60 s内对OTC有快速响应,在0.5～150μM范围内对OTC有良好的线性响应,检出限为0.05μM（S/N=3）。Py-FMIP传感器对OTC具有较高的灵敏度和良好的选择性,已成功应用于土霉素药片、废水和土壤中土霉素的测定。（3）以3-（溴乙酰基）香豆素为原料合成了香豆素离子液体单体（Coumarin-IL）,并以四环素（TC）为模版分子,丙烯酰胺和Coumarin-IL为功能单体,合成了适配体荧光分子印迹聚合物（aptamer-FMIP）。采用扫描电镜、透射电镜、EDS能谱等方法对aptamer-FMIP进行表征。基于aptamer-FMIP构建了一种高灵敏的荧光传感器用于检测TC。TC通过与aptamer-FMIP间的荧光共振能量转移过程（FRET）猝灭其荧光。优化了实验的p H值,并在最佳实验条件下测试其荧光性能,结果显示其在5～25 n M的浓度范围内呈良好线性,检出限为3 n M（S/N=3）。将aptamer-FMIP与非印迹材料（aptamer-FNIP）对比,相比于aptamer-FNIP,aptamer-FMIP对TC具有更高的荧光响应。该适配体分子印迹荧光传感器对TC具有较高的选择性和抗干扰性,在废水、土壤中TC含量的测定方面具有实际的应用价值。
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