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宫颈癌是第四位女性高发的恶性肿瘤.在中国,每年因宫颈癌死亡人数达5.3万例,占全国女性癌症全部死亡人数的18.4%.以手术、放疗为主,化疗为辅的综合治疗,能使大多数患者获益.但对于一些晚期或复发型宫颈癌,仍是临床工作中面临的困难与挑战.近年,针对拮抗PD-1/PD/L1通路的免疫疗法被认为是一种全新的治疗方法,但其收益人群有限.因此,寻求新的免疫治疗靶点或深入探讨宫颈癌免疫逃逸机制对肿瘤的诊治尤为重要.
免疫逃逸是肿瘤发展的十大原因之一.肿瘤微环境中的抑制性免疫细胞、负性免疫分子等一起构成免疫抑制网络,减弱机体防御器官功能,利于癌症发生.B7-H4是B7共刺激蛋白家族成员,主要存在于抗原提呈细胞表面,通过结合T细胞表面受体发挥抑制效应.研究显示,B7-H4的表达上调与癌症进展密切相关.Treg细胞属于免疫抑制细胞亚群,FOXP3是Treg细胞分化及维持抑制功能的重要转录调控因子.在肿瘤组织局部,Treg细胞抑制效应细胞的功能,或使抑制性细胞因子产生增多,从而促进肿瘤发展.本研究通过检测宫颈鳞状细胞癌及上皮内瘤变组织中 B7-H4、FOXP3+Treg细胞浸润情况,以及宫颈癌不同分期外周血及组织中Treg细胞表达,探讨肿瘤免疫逃逸在肿瘤发生过程中的关键机制,为宫颈癌的免疫治疗提供新的思路及理论依据.
第一部分以宫颈低级别鳞状上皮内瘤变( low grade squamous intraepithelial leision,LSIL),宫颈高级别鳞状上皮内瘤变(high grade squamous intraepithelial leision,HSIL),宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma ,SCC)为实验组,通过免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)检测了50例LSIL,50例HSIL,50例SCC及20例正常宫颈组织标本中 B7-H4和 FOXP3+Treg细胞表达及分布情况,分析B7-H4、FOXP3+Treg在宫颈病变中的表达差异及两者与宫颈癌临床病理之间的关系.
免疫组化结果显示B7-H4 在宫颈癌、HSIL及LSIL阳性率分别为78.0%(39/50)、44.0%(22/50)、34.0%(17/50),在正常宫颈组织B7-H4阳性率10.0%(2/20).与正常组相比,实验各组中B7-H4的表达明显高于正常组(P<0.05).在实验组,SCC组B7-H4表达水平明显高于HSIL组及LSIL组(P<0.001).与LSIL组相比,LSIL组和HSIL组间B7-H4的表达无显著差异(P>0.05).
Treg细胞在宫颈鳞状细胞癌、宫颈高级别上皮内瘤变及宫颈低级别上皮内瘤变的阳性细胞数分别是 87.08±18.06、48.30±13.00、7.04±7.37.与正常组相比,SCC组、HSIL组中Treg阳性细胞数均高于正常组(P<0.05),与LSIL组比较无明显差异(P>0.05).在实验组,SCC组Treg细胞表达明显高于HSIL组及LSIL组(P<0.001).
结合临床病理分析,宫颈癌组织中B7-H4的表达与FIGO分期、脉管浸润紧密相关(P<0.05).B7-H4的表达在FIGO分期II期者明显高于I期者;B7-H4的表达在有血管浸润患者中高于无血管浸润者.Treg细胞浸润与淋巴结转移与FIGO分期有关(P<0.05).淋巴结转移阳性患者Treg的表达高于淋巴结转移阴性者;FIGO分期Ⅱ者Treg的表达高于Ⅰ期者.同时,Spearman相关性分析结果显示子宫颈鳞状细胞癌中B7-H4和Treg细胞表达呈正相关(r=0.339, P<0.01 ).
第二部分采集了30例宫颈鳞状细胞癌、30例子宫肌瘤患者全血标本及相应宫颈组织.通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测了外周血中Treg(CD4+CD25+FOXP3+)细胞表达,采用免疫组化检测宫颈组织Treg的表达,探讨外周血Treg细胞表达与宫颈癌患者临床病理资料的关系.
流式细胞学结果显示,宫颈癌患者全血中Treg细胞占 CD4+T细胞比例明显高于对照组.免疫组化结果显示宫颈癌组织中Treg细胞的表达明显高于正常组,差异有统计学意义( P<0.05).外周血Treg细胞的表达与FIGO分期密切相关.外周血Treg细胞表达水平与癌组织中Treg表达呈显著正相关(r=0.467,P<0.01).
综上所述,B7-H4、Treg细胞可能参与宫颈病变的发展及恶性转化,两者协同能促进宫颈癌的侵袭、转移.宫颈癌组织中高表达的B7-H4,招募FOXP3+Treg细胞到肿瘤周围聚集,引起恶变细胞免疫逃逸.B7-H4、Treg的高表达与宫颈癌患者的临床病理特征密切相关,预测两者可能对宫颈癌患者的预后有临床价值.此外,宫颈癌患者外周血中高比例的Treg细胞也可削弱自身的抗肿瘤免疫.
免疫逃逸是肿瘤发展的十大原因之一.肿瘤微环境中的抑制性免疫细胞、负性免疫分子等一起构成免疫抑制网络,减弱机体防御器官功能,利于癌症发生.B7-H4是B7共刺激蛋白家族成员,主要存在于抗原提呈细胞表面,通过结合T细胞表面受体发挥抑制效应.研究显示,B7-H4的表达上调与癌症进展密切相关.Treg细胞属于免疫抑制细胞亚群,FOXP3是Treg细胞分化及维持抑制功能的重要转录调控因子.在肿瘤组织局部,Treg细胞抑制效应细胞的功能,或使抑制性细胞因子产生增多,从而促进肿瘤发展.本研究通过检测宫颈鳞状细胞癌及上皮内瘤变组织中 B7-H4、FOXP3+Treg细胞浸润情况,以及宫颈癌不同分期外周血及组织中Treg细胞表达,探讨肿瘤免疫逃逸在肿瘤发生过程中的关键机制,为宫颈癌的免疫治疗提供新的思路及理论依据.
第一部分以宫颈低级别鳞状上皮内瘤变( low grade squamous intraepithelial leision,LSIL),宫颈高级别鳞状上皮内瘤变(high grade squamous intraepithelial leision,HSIL),宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma ,SCC)为实验组,通过免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)检测了50例LSIL,50例HSIL,50例SCC及20例正常宫颈组织标本中 B7-H4和 FOXP3+Treg细胞表达及分布情况,分析B7-H4、FOXP3+Treg在宫颈病变中的表达差异及两者与宫颈癌临床病理之间的关系.
免疫组化结果显示B7-H4 在宫颈癌、HSIL及LSIL阳性率分别为78.0%(39/50)、44.0%(22/50)、34.0%(17/50),在正常宫颈组织B7-H4阳性率10.0%(2/20).与正常组相比,实验各组中B7-H4的表达明显高于正常组(P<0.05).在实验组,SCC组B7-H4表达水平明显高于HSIL组及LSIL组(P<0.001).与LSIL组相比,LSIL组和HSIL组间B7-H4的表达无显著差异(P>0.05).
Treg细胞在宫颈鳞状细胞癌、宫颈高级别上皮内瘤变及宫颈低级别上皮内瘤变的阳性细胞数分别是 87.08±18.06、48.30±13.00、7.04±7.37.与正常组相比,SCC组、HSIL组中Treg阳性细胞数均高于正常组(P<0.05),与LSIL组比较无明显差异(P>0.05).在实验组,SCC组Treg细胞表达明显高于HSIL组及LSIL组(P<0.001).
结合临床病理分析,宫颈癌组织中B7-H4的表达与FIGO分期、脉管浸润紧密相关(P<0.05).B7-H4的表达在FIGO分期II期者明显高于I期者;B7-H4的表达在有血管浸润患者中高于无血管浸润者.Treg细胞浸润与淋巴结转移与FIGO分期有关(P<0.05).淋巴结转移阳性患者Treg的表达高于淋巴结转移阴性者;FIGO分期Ⅱ者Treg的表达高于Ⅰ期者.同时,Spearman相关性分析结果显示子宫颈鳞状细胞癌中B7-H4和Treg细胞表达呈正相关(r=0.339, P<0.01 ).
第二部分采集了30例宫颈鳞状细胞癌、30例子宫肌瘤患者全血标本及相应宫颈组织.通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测了外周血中Treg(CD4+CD25+FOXP3+)细胞表达,采用免疫组化检测宫颈组织Treg的表达,探讨外周血Treg细胞表达与宫颈癌患者临床病理资料的关系.
流式细胞学结果显示,宫颈癌患者全血中Treg细胞占 CD4+T细胞比例明显高于对照组.免疫组化结果显示宫颈癌组织中Treg细胞的表达明显高于正常组,差异有统计学意义( P<0.05).外周血Treg细胞的表达与FIGO分期密切相关.外周血Treg细胞表达水平与癌组织中Treg表达呈显著正相关(r=0.467,P<0.01).
综上所述,B7-H4、Treg细胞可能参与宫颈病变的发展及恶性转化,两者协同能促进宫颈癌的侵袭、转移.宫颈癌组织中高表达的B7-H4,招募FOXP3+Treg细胞到肿瘤周围聚集,引起恶变细胞免疫逃逸.B7-H4、Treg的高表达与宫颈癌患者的临床病理特征密切相关,预测两者可能对宫颈癌患者的预后有临床价值.此外,宫颈癌患者外周血中高比例的Treg细胞也可削弱自身的抗肿瘤免疫.