重组沙门氏菌鞭毛素蛋白在防龋疫苗中的佐剂活性研究

• 作 者: 石伟
• 机 构: 中国科学院大学
• 出 处: 中国科学院研究生院 中国科学院大学
• 发表日期: 2010年期
• 关键词: 变形链球菌 龋齿 沙门氏菌 鞭毛素蛋白 防龋疫苗 佐剂活性

龋病是人类最常见的细菌感染性疾病之一，变形链球菌（Streptoccoccus mutans）是其主要致病菌。变形链球菌能产生一种表面蛋白PAc，PAc蛋白参与介导细菌最初粘附到牙齿表面、随后的细菌聚集和牙菌斑的形成过程，因此将毒力因子PAc作为候选抗原经过免疫途径来抑制病原菌的感染，可以达到预防龋齿的目的。DNA疫苗是指将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体免疫机体，使外源基因在活体内表达，从而刺激免疫系统产生特异性的免疫应答，我们所用的pGJAP就是由武汉大学口腔医学院构建的一种防龋DNA疫苗。　　
由于DNA疫苗的免疫原性差，蛋白疫苗受粘膜障碍的影响，所以需要一个有效的佐剂来诱导更高的抗体应答，特别是提高口腔唾液样中的特异性S-IgA的滴度，从而来达到免疫防龋的目的。　　
鞭毛素可被细胞表面的TLR5识别，当鞭毛素被宿主表面TLR5识别后，可迅速诱导机体释放大量的细胞因子和趋化因子，上调DC细胞表面共刺激分子的表达，启动宿主的先天防御反应而启动获得性免疫反应。基于这些特征，鞭毛素佐剂活性得到关注并进行了广泛研究，成为新型佐剂的候选。　　
本课题选用沙门氏菌来源的重组鞭毛素蛋白(FliC)为佐剂，通过滴鼻免疫途径，来研究其对防龋疫苗（DNA疫苗pGJAP和蛋白疫苗PAc）提高血清和唾液样中特异性免疫反应的能力，以及对防龋疫苗防龋保护力的研究。采用SPF级BALB/c小鼠和SPF级Wistar大鼠为动物模型，分别研究抗体应答反应以及防龋能力。研究结果表明，FliC是一种有效的粘膜佐剂:在小鼠体内，能提高DNA疫苗和蛋白疫苗诱导特异性抗体的能力，同时在较长时期内能稳定维持较高抗体滴度;在大鼠体内，能提高DNA疫苗和蛋白疫苗诱导特异性抗体的能力，特别是唾液S-IgA，进而能抑制口腔病原菌的定植，预防和保护大鼠患龋齿的概率和程度。说明FliC是一种有效的粘膜佐剂，能诱导更高抗体滴度和提高疫苗的保护力，是一种潜在的、有应用前景的佐剂。本课题第一次将佐剂flagellin结合到防龋DNA疫苗和蛋白疫苗上，并证明了flagellin的在防龋疫苗中的佐剂活性。