【摘 要】
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该文利用以β-半乳糖苷酶基因为标志基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV-hsp70/lacZ)在中肠组织水平上研究荧光增白剂对该病毒的增效作用及其增效作用方式.三龄甜
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该文利用以β-半乳糖苷酶基因为标志基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV-hsp70/lacZ)在中肠组织水平上研究荧光增白剂对该病毒的增效作用及其增效作用方式.三龄甜菜夜蛾经口服感染病毒的生物测定表明:1％光增白剂FB-28对该重组病毒具有明显的增效作用.添加荧光增白剂FB-28的病毒感染3龄末甜菜夜蛾幼虫其LC<,50>从2.31×10<7>PIBs/ml降低到5.18×10<4>PIBs/ml,增效比值达到448倍.当病毒浓度为1.55×10<7> PIB/ml时,加有FB-28的LT<,50>为4.6d(r=0.9437),单剂量的病毒液感染3龄幼虫的LT<,50>为7.0d(r=0.9798),杀虫速度提高了34.3％.此外,对于处于不同虫龄的幼虫进行病毒感染时发现:对316幼虫毒力生物测定时,荧光增白剂的增效作用达到50％,但对4龄初的供试幼虫进行测定,荧光增白剂的增效作用却不很明显,仅为10％.此结果表明荧光增白剂对不同虫龄阶段的幼虫增效能力存在较大的差异.选用2.25×10<7>PIB/ml的病毒悬液感染3<16>、4<0>甜菜夜蛾幼虫.病毒感染后的8h,12h,16h,20h提取中肠组织,按常规石蜡包埋切片进行洗涤、透明、浸蜡、包埋、切片、粘片等操作程序,制成连续切片,在倒置显微镜下逐一进行观察计数.结果如下:幼虫中肠的报告基因表达率(病毒在中肠部位形成的病灶)数字显示:荧光增白剂确实可以提高幼虫对病毒的敏感性.实验组幼虫中肠的报告基因表达率(病毒在中肠部位形成的病灶)要明显高于对照组中幼虫中肠的报告基因表达率.此外,实验组中供试幼虫中肠的报告基因表达率均随感染时间的延长而增高,但在感染后20 h左右,供试幼虫中肠的报告基因表达率却有所降低,对此,我们分析其原因可能是由于病毒的感染部位发生了转移.
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