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茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)是我国重要的经济作物之一,不仅栽培历史悠久,而且分布广泛。已有研究表明,我国西南部是茶树的起源中心,孕育了丰富的茶树种质资源,其遗传多样性为世人瞩目。目前,我国已在浙江杭州、云南勐海建成两个国家级茶树种质资源圃,保存了3300多份茶树种质材料,如此丰富的资源为我们进行茶树品种选育和生物技术研究提供了坚实的物质基础。近年来发展起来的RAPD标记技术能够直接从DNA水平反映材料间的遗传差异,方法简便快捷,是研究生物遗传多样性的有力工具。 本实验选用原产四川以及从福建、浙江、贵州、湖南、广州、安徽、江苏引进四川茶区的36份茶树栽培品种为材料,探讨适合本试验供试材料基因组DNA提取的方法以及RAPD扩增反应体系和程序,根据RAPD扩增图谱,统计出所有二元数据,以此建立数据文件并统计出总带数、共有带数、特征带,计算出多态性和供试茶树品种间的遗传距离,分析其遗传多样性,依据遗传距离并结合类平均法(UPGMA),构建茶树品种间亲缘关系的分子系统树状图。另外,利用RAPD引物产生的特殊标记和特殊的谱带类型,进行茶树栽培品种的分子鉴别。结果如下: 1、从50条随机引物中筛选出扩增效果良好的16条,共扩增出167条谱带,其中158条为多态性带,占94.61%,平均每条引物扩增出的条带为10.4条。最多的为15条,最少的也有7条。遗传距离的变异范围为0.149~0.679,平均为0.412。 2、对36份资源进行亲缘关系的UPGMA聚类分析,结果表明,当以欧氏距离为0.385来划分时,36份茶树栽培品种聚为3个复合组和2个独立组。第一类包括原产四川的蜀永307、早白尖5号、南江4号、名山白毫、名山早、蒙山9号、蒙山11号、蒙山23号和原产贵州的黔湄419;第二类包括原产福建和浙江的福鼎大白茶、福选9号、福鼎大毫茶、梅占、政和、元宵茶、龙井43、龙井长叶、浙农117、平阳特早、乌牛早、黄叶早、青峰、茂绿、碧云、迎霜、安吉白茶以及从福选9号变异的个体单株中选育出的名选213;第三类包括原产湖南、广东、安徽、江苏的东湖早、槠叶齐、英红1号、英红2号、凫早2号、锡茶5号、锡茶11号。南江3号、黔湄502则游离在这3大类之外,分别单独聚为一类。 3、利用16条RAPD引物扩增产生的40个特异标记的存在和12个特异标记的缺失,可以鉴定蜀永307、南江3号、名山白毫等共29份资源。引物S3扩增的27