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铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo),兰科石斛属植物,是传统名贵中药材,具有益胃生津、滋阴清热等功效;可用于治疗高血压、糖尿病、慢性萎缩性胃炎、肿瘤等疾病;并且有抗衰老,提高免疫力等作用。但有关铁皮石斛活性成分与药理作用的关联性研究比较少,铁皮石斛主要活性成分的作用机制需要做进一步研究。多糖是铁皮石斛的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、降血糖等作用。已有的研究表明,多糖所具有的药理活性可能与其寡聚糖组成相关。因此,本文开展了铁皮石斛多糖酶解的探索研究,对浙江铁皮石斛的多糖采用糖苷酶的处理方法,对酶解产物采用柱前衍生化液相的检测手段。研究酶解产物对大鼠神经胶质细胞C6和小鼠B淋巴细胞MPC-11的免疫因子78KD葡萄糖调节蛋白(GRP78)表达、白介素-6(IL-6)和免疫球蛋白G(IgG)分泌的影响,并且对浙江和云南铁皮石斛多糖的差异性进行分析,取得的研究结果如下:1,采用水提醇沉法提取多糖的含量及组成不同。其中,浙江产地的铁皮石斛多糖含量为32.1%,云南产地的铁皮石斛多糖含量为33.4%。铁皮石斛多糖经三种糖苷酶Cellulase(C)、Glucuronidase(G)和Xylanase(X)酶解处理,不同糖苷酶处理相同多糖,酶解产物不同。不同产地多糖,同一糖苷酶处理,酶解产物不同。不同产地铁皮石斛单糖组成相同,含量有差异。2,浙江,云南铁皮石斛多糖酶解产物对相关免疫因子表达的影响,用多糖的三种糖苷酶酶解产物处理C6细胞株,处理组IL-6蛋白的分泌水平高于对照组,但是没有剂量效应。三种多糖酶解产物(C、G、X)处理MPC-11细胞株,处理组GRP78蛋白表达量均明显高于对照组。C和G酶处理组IgG蛋白的分泌水平高于对照组,且呈现浓度效应。3,铁皮石斛多糖糖苷酶酶解产物的细胞毒性分析,三种酶解产物处理C6细胞株,与对照组相比,C、G、X酶解产物既不促进细胞增值,也没有细胞毒性作用。C、G、X酶解产物处理HEK293细胞株,与对照组相比,C、G、X酶解产物既不促进细胞增殖,也没有细胞毒性作用。