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小檗碱(黄连素,berberine)是从毛莨科黄连属(Coptis ChinensisFranch)根状茎中提取的异喹啉类生物碱,为黄连的主要成分.对氯苄基四氢小檗碱(CPU-86017)的化学名为7-(4-氯苄基)-5,8,13,13a四氢小檗碱氯化物,为改构的四氢小檗碱类化合物.该实验拟采用全细胞膜片钳技术,从电生理角度研究小檗碱和CPU-86017对大鼠海马神经元,心室肌细胞及肝细胞多种离子通道的作用,以期从通道水平阐明它们的作用机制,为小檗碱和CPU-86017的临床应用提供可靠的理论依据,为开发和利用中国的中药宝库作贡献.第一部分:小檗碱及其衍生物CPU-86017对大鼠海马神经元钾、钙、钠电流的影响;§1小檗碱和CPU-86017对大鼠海马神经元钾电流的影响;用酶消化法分离大鼠海马神经元,用全细胞膜片钳技术研究小檗碱和CPU-86017对海马神经元瞬时外向钾电流(transient outward potassiumcurrent,I<,to>)和延迟整流钾电流(delayed rectifier potassium current,I<,K>)的影响.§2小檗碱和CPU-86017对大鼠海马神经元钙电流的影响;用全细胞膜片钳技术记录大鼠海马神经元钙电流(calcium current,I<,Ca>),研究小檗碱和CPU-86017对I<,Ca>的作用. 第二部分:小檗碱及其衍生物CPU-86017对大鼠心室肌细胞钾、钙、钠电流的影响;§1小檗碱和CPU-86017对大鼠心室肌细胞钾电流的影响; 酶消化法分离大鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术研究小檗碱和CPU-86017对心室肌细胞I<,to>,I<,K>和内向整流钾电流(inward rectifierpotassium current,I<,K1>)的影响.第三部分:小檗碱及其衍生物CPU-86017对大鼠肝细胞钾、钙电流的影响;§1小檗碱和CPU-86017对大鼠肝细胞钾电流的影响; 用酶消化法分离大鼠肝细胞,用全细胞膜片钳技术研究小檗碱和CPU-86017对肝细胞I<,K>和I<,K1>的影响.结论:小檗碱和CPU-86017对大鼠海马神经元钾、钙、钠电流均有阻滞作用,提示其神经保护作用与它们阻滞多种离子通道的作用有关.CPU-86017抑制I<,K>的EC<,50>明显小于其抑制I<,to>的EC<,50>,表明它对I<,K>的亲和力大于对I<,to>的亲和力.小檗碱抗心律失常作用主要与其阻滞I<,K>,I<,K1>和I<,Ca >有关.CPU-86017抗心律失常作用的主要作用靶点为I<,K>,I<,Ca>,I<,to>和I<,Na>,且对各种电流的抑制作用强度明显高于小檗碱,提示小檗碱改构后,其抗心律失常作用有所增强.小檗碱对大鼠肝细胞钾电流和钙电流均有抑制作用,提示其肝脏保护作用可能与阻断肝细胞离子通道有关.CPU-86017抑制大鼠肝细胞钾电流,且作用强于小檗碱,对钙电流无影响,提示CPU-86017可能也具有肝保护作用,其作用可能与阻滞I<,K>有关.该文就小檗碱和CPU-86017对大鼠海马神经元,心室肌细胞和肝细胞多种离子通道的作用进行了深入和系统的研究,为它们在多领域的应用提供了通道水平的作用机制,为揭示小檗碱和CPU-86017的新作用、新用途提供了科学资料和可靠的理论依据.