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目的：研究Ashwagandha叶子提取物，对肿瘤的迁移和侵袭起到的作用及其发生的机制，并研究其对Mortalin诱导的乳腺癌上皮-间质转化的作用。 材料与方法：应用细胞迁移实验、微球体形成实验、蛋白印迹法实验和观察细胞的形态学变化来描述Mortalin过表达细胞（MDA-MB231/H2F）的特性。利用细胞生存率检测实验，细胞迁移实验，细胞侵袭实验，细胞划痕实验来检测Ashwagandha能否抑制Mortalin蛋白诱导的乳腺癌上皮-间质转化，并利用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测细胞上皮标记物E-cadherin以及细胞间质标记物Vimentin、Fibronectin的表达情况。此外，利用蛋白印迹法检测AKT和pAKT的表达情况，深入研究乳腺癌上皮-间质转化调控机制及信号传导通路。 结果： 1.Mortalin过表达诱导体内乳腺癌上皮-间质转化。倒置显微镜观察MDA-MB231细胞和Mortalin蛋白过表达细胞MDA-MB231/H2F发现，后者细胞连接松散，并形成明显的伪足，表明过表达的Mortalin蛋白，使其获得间质细胞的特性。利用细胞细胞迁移实验、蛋白印记实验、微球体形成实验来深入证明这一结果。发现在细胞细胞迁移实验中，MDA-MB231/H2F细胞的迁移细胞数，多于MDA-MB231细胞而且微球体形成实验中可发现，MDA-MB231/H2F的细胞所形成的微球体远大于MDA-MB231细胞形成的微球体。蛋白印迹法检测细胞上皮标记物E-cadherin以及细胞间质标Vimentin、Fibronectin的表达发现，MDA-MB231/H2F细胞的E-cadherin蛋白表达量小于MDA-MB231细胞，Vimentin、Fibronectin的表达量则大于MDA-MB231细胞。 2.Ashwagandha对MDA-MB231/H2F细胞的计量依赖性产生的影响。为了观察Ashwagandha对MDA-MB231/H2F细胞的增殖起到的影响，进行了细胞生存率检测实验，结果表明在200μg/ml浓度的作用下未能对细胞的增殖起到作用，直到浓度达到400μg/ml之后明显抑制MDA-MB231/H2F细胞的增殖。 3.Ashwagandha在MDA-MB231/H2F细胞中调节上皮-间质转化相关蛋白的表达。蛋白印迹法检测细胞上皮标记物E-cadherin以及细胞间质标Vimentin、Fibronectin的表达发现，与DMSO处理过的经比较组相比较时，经Ashwagandha200μg/ml、400μg/ml处理24小时之后的细胞组，E-cadherin的表达量明显升高，反之，经Ashwagandha400μg/ml处理之后，Vimentin，Fibronectin的表达量明显降低。细胞免疫荧光实验结果进一步确认了这个结果，经Ashwagandha处理的细胞，其E-cadherin染色呈明显强阳性,未经处理的细胞其表达为弱阳性，Vimentin的表达则相反,经Ashwagandha处理的细胞其表达为弱阳性,未经处理的细胞器表达呈强阳性。 4.Ashwagandha通过抑制Mortalin诱导的上皮-间质转化来预防肿瘤的迁移和侵袭。利用细胞划痕实验观察 Ashwagandha对细胞迁移的影响，发现未经Ashwagandha处理的细胞分别在3小时、6小时侵入划痕部位，形成的细胞集落明显多于Ashwagandha处理后的组群。此外，分别利用细胞迁移实验和细胞侵袭实验来进一步证明这个结果发现，经Ashwagandha处理之后，MDA-MB231/H2F的细胞的迁移细胞数明显少于未经Ashwagandha处理的细胞，同样在细胞侵袭实验中发现Ashwagandha处理后MDA-MB231/H2F的细胞的侵袭细胞数明显少于未经Ashwagandha处理的细胞。5.磷脂酰基酶3激酶（PI3K-AKT）途径在促进细胞的移动度中是必要的信号途径。利用蛋白印迹法检测Mortalin能否激活AKT和磷酸化AKT蛋白的表达，并且检测Ashwagandha能否对此种蛋白的表达起到的作用。结果表明，Mortalin过表达的MDA-MB231细胞中，磷酸化AKT的表达量多于Mortalin正常表达的MDA-MB231细胞，然而，AKT的表达量没有大的差异。此外，经Ashwagandha处理之后的细胞AKT的表达量，少于未经Ashwagandha处理的细胞，磷酸化AKT的表达量则没有大的差异。总之，以上结果表明，在乳腺癌细胞中，磷脂酰基酶3激酶（PI3K-AKT）途径在Mortalin促进细胞的迁移的过程中起到重要的作用；而且Ashwagandha可以抑制AKT和磷酸化AKT蛋白的表达。 结论：Mortalin蛋白的过表达，可以诱导诱导乳腺癌上皮-间质转化，此外，Ashwagandha可被推荐为一种新的肿瘤治疗剂。