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目的: 评价用于HIV窗口期感染诊断的pooled HIV RNA RT-PCR方法和第四代HIVELISA方法:将两种方法在HIV高危人群中进行初步应用,进行可行性尝试:为两种方法用于估计HIV发病率的可行性做初步探讨;比较适用于窗口期感染检测的各种方法,为在中国HIV高危人群中推广HIV窗口期感染筛查做初步探讨。
方法:1.50:1,10:1,1:1三阶段混合的pooled HIVRNART-PCR方法盲法验证及可重复性验证:检测3020份献血人群和2530份吸毒人群的HIV抗体阴性血清或血浆样本。对发现的RNA阳性感染者进行追踪采样。
2.用8个BBI阳转血清盘(45份)样本和来自不同高危人群的558份库存WB阳性血清样本分别评价Murex HIV Ag/Ab Combination试剂盒检测抗原和抗体的敏感性;检测来自不同高危人群的2446份HIV抗体阴性样本,阳性样本进一步用MurexHIV Antigen Mab检测,抗原阳性者测定病毒载量;追踪可疑窗口期感染者;计算Ag/Ab联合检测试剂盒的特异度。
3.对1040份四川吸毒人群HIV抗体阴性样本(包括在2446份中)分别用Murex HIVAg/Ab Combination试剂盒和pooled HIV RNA RT-PCR方法检测,比较两种方法。
4.用相应的数学模型计算HIV发病率。
5.实验数据采用Excel或SPSS进行统计分析。
结论: 实验室的pooled HIV RNA RT-PCR方法已通过NIH专家的认可,并应用于HIV高危人群筛查。第四代HIV ELISA试剂与第三代试剂相比可以缩短窗口期,发现急性HIV感染者;检测抗体的能力良好。这两种方法以及单份样本的病毒载量检测、单独p24抗原检测和HIVDNA或RNA定性检测各有不同的特点,可以根据不同的情况选择不同的方法用于窗口期感染的检测。窗口期感染诊断估计HIV发病率的数据有一定的参考意义,有待进一步研究。本研究采集到两套HIV系列阳转血样,对我国HIV阳转血清盘的制备具有参考价值。