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鸡蛋营养物质全面,富含大量的维生素、矿物质及高生物利用价值的蛋白质,氨基酸成分与人体组织的组成极为接近。我国鸡蛋产量约占全世界总产量40%,且近十年间消费量年均复合增长2.25%,显示出对鸡蛋的强大市场需求。家禽育种已使很多商品蛋鸡具有很高的产蛋性能,但是还有很大的提升空间,特别是对于口感风味更受国人欢迎的本地蛋鸡品种;同时产蛋过程的很多机理仍然处于未知,有待更进一步的研究。本文旨在研究卵巢生成的雌激素对肝脏卵黄蛋白生成的调节机制,同时通过对不同生产性能蛋鸡的卵黄物质生成作用及相关血液生化指标的定量比较研究其与产蛋性能的相关性,为更进一步提升产蛋性能提供理论和实践基础。 1蛋鸡脂质蛋白生成能力与产蛋性能的关系研究 脂质和蛋白类物质占了蛋黄的绝大部分,而卵黄的沉积是产蛋过程中的很重要一个步骤,产蛋期卵黄物质的大量需求必然涉及到大量卵黄前体物质的摄取和合成,肝脏作为机体内最重要的代谢中心,负责家禽60%的脂类生成,同时也是蛋白质的消化代谢枢纽。卵黄物质前体物质的生成能力是否会是蛋鸡产蛋性能的一个制约因素,目前还没有相关研究。本实验以不同产蛋性能蛋鸡(振宁土鸡和海兰蛋鸡)作为实验模型,通过对其脂类蛋白生成能力和相关血液生化指标进行定量比较,旨在探讨其与产蛋性能的关系。结果表明,两种产蛋鸡的肝脏在脂质合成代谢基因的表达上除过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)外没有差异,在卵黄蛋白前体物的表达上基本一致;酶联免疫分析发现血液中肝脏合成的主要的卵黄前体物-卵黄蛋白原Ⅱ(VTGⅡ)表达量无显著差异;另外对血清中总蛋白、甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的测定发现,只有甘油三酯的浓度有显著差异,海兰蛋鸡血清中的浓度更高。即两种产蛋鸡虽然产蛋性能不一样,但在肝脏对卵黄的合成方面无显著差异。虽然振宁土鸡的产蛋率较低,但卵黄前体蛋白的合成能力却与海兰蛋鸡类似。因此,卵黄的合成能力也许在对产蛋性能的影响方面不是主要因素,综合本实验室的其他研究结果,我们建议后续的研究可能应该更多的着眼于卵巢和输卵管,特别是卵泡的发育和输卵管中卵清蛋白的合成能力。 2雌激素核受体ERα介导雌激素诱导的鸡肝脏中卵黄蛋白前体物-卵黄生成素Ⅱ(VTGⅡ)和极低密度脂蛋白Ⅱ(VLDLⅡ)的生成 类固醇激素及其受体在脊椎动物的生长发育和生殖活动中起着重要的作用,对于鸟类来说,产蛋的许多环节都与其调节作用紧密相关,蛋黄中很多物质的生成都是雌激素依赖性。雌激素诱导的下游的基因表达主要通过雌激素核受体ERα和ERβ及G蛋白偶联的膜受体(GPR30)介导实现。本实验旨在研究雌激素受体在卵巢生成的雌激素诱导肝脏中卵黄蛋白原生成的作用。首先检测了同一蛋鸡品种在不同生殖阶段,肝脏中雌激素受体和不同卵黄蛋白原的表达模式;然后以鸡胚肝细胞为实验模型,通过不同受体选择性的激动剂和拮抗剂处理,检测下游卵黄蛋白前体物VTGⅡ和VLDLⅡ的表达,探明参与此过程的雌激素受体。结果表明:17β-雌二醇和PPT(ERα受体激动剂)呈剂量依赖性的诱导VTGⅡ和VLDLⅡ的表达;DPN(ERβ受体激动剂)只在高浓度时起到微弱的激动作用;G-1(GPR30激动剂)对于两中卵黄蛋白前体物的表达没有任何效果;而MPP(ERα受体拮抗剂)可以几乎完全拮抗17β-雌二醇、MPP、 DPN对于两种卵黄蛋白原的诱导作用。考虑到:(1)在MPP处理后,雌激素作用的效果只能通过ERα途径介导;(2)DPN可以在高浓度时一定程度激活ERα受体的作用,且这个过程可以被ERα受体的拮抗剂有效阻断,说明ERβ不参与肝脏中卵黄蛋白原的合成过程,或者不是起主要作用。以上研究结果表面,两种非常重要的卵黄蛋白原,VTGⅡ和VLDLⅡ,在鸡肝脏中的合成主要是由雌激素受体α介导。 综上所述,本研究证实了两种重要的卵黄前体物(VTGⅡ和VLDLⅡ)在鸡肝脏中合成是由雌激素诱导转录,且雌激素信号由雌激素受体ERα介导,推测作用于α受体的雌激素类似物日粮可以一定程度提高肝脏中卵黄合成;此外,经世代选育的本地蛋鸡品种也有很强的卵黄生成能力,其产蛋性能可能更多由卵泡发育和卵清蛋白合成能力制约,这两者也许可以作为产蛋性能提升的考虑的因素。