【摘 要】
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目的研究缺氧缺血(hypoxic ischemic, HI)对妊娠中期人类胚胎脑脑室管膜下区(subventricular zone, SVZ)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)、神经元、神经胶质细胞(星形胶
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目的研究缺氧缺血(hypoxic ischemic, HI)对妊娠中期人类胚胎脑脑室管膜下区(subventricular zone, SVZ)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)、神经元、神经胶质细胞(星形胶质细胞、少突胶质祖细胞和小胶质细胞)的影响,比较不同细胞对HI损伤的耐受性差异,揭示缺氧缺血脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damaged , HIBD)及其它发育脑损伤性疾病的多种脑功能障碍表现的细胞学基础。探讨脑活素、NGF对HI损伤的SVZ神经细胞的保护作用,为临床用药提供实验及理论依据。方法取妊娠17~22孕周(gestational weeks,gw)的健康胚胎脑5例,即刻解离出SVZ细胞,以氧糖缺失法(oxygen/glucose deprivation, OGD)[1]建立HI损伤模型,计算HI组和正常组细胞成活率。将HI组和正常组SVZ细胞按A药(NGF)、B药(脑活素)两因素,用药、不用药两个水平,交叉分成4组培养,培养4小时后以细胞特异性标志蛋白nestin、MAP2、GFAP、PDGFRα及RCA120的抗体通过免疫荧光细胞化学法鉴定SVZ的5种主要细胞:NSCs、神经元、星形胶质细胞、少突胶质祖细胞及小胶质细胞。比较HI组和正常组5种细胞含量的改变,分析两药对HI和正常组SVZ细胞总数、对HI组SVZ神经元数的影响。结果妊娠中期人类胚胎脑SVZ中含有15.08±0.02%的nestin(+)NSCs、48.81±0.03%的MAP2(+)神经元、32.31±0.03%的GFAP(+)星形胶质细胞、6.92±0.02%的PDGFRα(+)少突胶质祖细胞和1.15±0.01%的RCA120(+)小胶质细胞。细胞成活率:HI组为63.41±0.06%,正常组为98.9±0.01%。HI组细胞成活率明显低于正常组,差异具有显著性(p<0.001),提示HI后SVZ细胞损伤明显。5种SVZ细胞的百分含量结果比较:nestin(+)的NSCs分别占HI组和正常
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