【摘 要】
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KGF-2、bFGF核转位机制的初步探讨 KGF-2和bFGF同属成纤维细胞生长因子家族，它们都是多效能的细胞因子，在许多重要的生理过程中发挥作用。这些过程包括细胞分化、增殖、血管
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 解放军军事医学科学院
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KGF-2、bFGF核转位机制的初步探讨 KGF-2和bFGF同属成纤维细胞生长因子家族，它们都是多效能的细胞因子，在许多重要的生理过程中发挥作用。这些过程包括细胞分化、增殖、血管生成、肿瘤发生、损伤修复、胚胎发育等。目前关于它们发挥作用的分子机制还不是十分清楚，我们根据分子生物学原理，结合基因重组、酵母双杂交、哺乳动物细胞双杂交、细胞培养等方法对KGF-2和bFGF相互作用蛋白进行了初步研究。研究结果可概述为以下几个方面： 一、采用PCR方法，从人胎肝cDNA文库中成功钓取了KGF-2和bFGF基因。 二、利用酵母双杂交系统2筛选KGF-2和bFGF的相互作用蛋白。构建KGF-2和bFGF的诱饵蛋白载体pAS2-1-KGF-2和pAS2-1-bFGF并分别转化至酵母宿主Y190，对KGF-2和bFGF自身的转录激活活性进行了分析，结果表明KGF-2和bFGF自身不具有转录激活活性。通过对胎肝cDNA文库的筛选，得到了2个与KGF-2存在相互作用的蛋白。序列分析和同源检索表明：它们分别为未知蛋白PR02605和人核糖体蛋白L22(RPL22)。文献检索显示它们都是新发现的可能和KGF-2发生相互作用的蛋白质。目前对RPL22了解较多，它含有三个结构域，分别是N-结构域、I-结构域和C-结构域，在RPL22的N端有一个经典的核定位信号。KGF-2与RPL22之间的相互作用可能是其进入细胞核的途径之一。 三、利用哺乳动物细胞双杂交系统在COS-7细胞内验证了KGF-2与人核糖体蛋白L22间的相互作用。 四、利用外源性KGF-2和bFGF刺激NIH／3T3细胞，观察人核糖体蛋白L22基因表达的变化。结果显示，KGF-2和bFGF作用于细胞后使RPL22基因表达水平升高。
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