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目的为了探索内质网应激—线粒体细胞凋亡途径在氟中毒导致的HepG2细胞凋亡机制中作用。本文检测了经氟化钠处理的HepG2肝细胞中葡萄糖调节蛋白78（Glucose-regulated protein78, GRP78）、葡萄糖调节蛋白94（Glucose-regulated protein94, GRP94）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT／enhancer—binding protein homologous protein，CHOP）等内质网应激反应蛋白的mRNA和蛋白表达；同时亦检测了凋亡诱导因子（apoptosis-inducingfactor,AIF）、B淋巴细胞瘤-2（B-cells lymphoma-2, Bcl-2）、与Bcl-2共沉淀的X蛋白质（Bcl-as-sociated X protein, Bax）、细胞色素C（Cytochrome C）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase, caspase)9和3等线粒体细胞凋亡途径相关蛋白的表达，揭示内质网应激—线粒体细胞凋亡途径等病理因素导致肝细胞凋亡的机制。方法HepG2细胞行常规培养；分别选取0mM（对照组）、0.5mM、1mM、2mM、3mM、6mM和9mM等不同浓度的NaF处理HepG2细胞24h、48h及72h；光镜下观察不同浓度NaF处理HepG2细胞后细胞形态的改变；利用流式细胞分析仪检测HepG2细胞的凋亡率；MTT方法对上述浓度NaF处理下引起的线粒体功能损伤进行检测；实时荧光定量PCR（Real-timePCR）检测GRP78，GRP94，CHOP和AIF在不同浓度NaF处理下mRNA的表达；免疫印迹（Western Blot）方法，从蛋白质水平检测GRP78、GRP94、CHOP、AIF、Bcl-2、Bax、Cytochrome C、Caspase9及Caspase3的活性改变。结果不同浓度NaF处理HepG2细胞24h后观察到，随着NaF处理浓度的升高，HepG2细胞形态逐渐变得不规则，由梭形逐渐变成圆形。流式细胞分析仪检测HepG2细胞的凋亡率，结果显示在相同处理时间下，细胞凋亡率与NaF处理浓度呈正相关，且在2mMNaF处理24h后，HepG2细胞凋亡率明显增加。在上述条件下，MTT检测NaF对HepG2细胞产生的毒性作用，结果表明细胞毒性表现在相同处理时间下与NaF处理浓度呈正相关，且在2mM NaF处理24h后，细胞毒性明显增加。用Real-timePCR和Western Blot方法检测内质网应激反应蛋白GRP78、GRP94和CHOP的mRNA和蛋白表达水平，结果显示3mM NaF处理HepG2细胞24h后，GRP78和CHOP的mRNA和蛋白表达水平较对照组明显升高；而GRP94的mRNA较对照组明显升高，蛋白水平较对照组下降。同时，线粒体凋亡蛋白AIF的mRNA和蛋白表达水平较对照组明显升高。Western Blot方法检测到3mM NaF处理细胞24h，线粒体细胞凋亡途径相关蛋白Bcl-2、Cytochrome C、Caspase9、Caspase3蛋白在胞浆中的表达较对照组明显升高；而Bax则较对照组明显降低。结论在HepG2肝细胞氟中毒模型中，通过检测内质网应激反应蛋白GRP78、GRP94和CHOP的mRNA以及蛋白表达水平，观察到HepG2细胞在NaF处理下发生了内质网应激反应；通过检测AIF、Bcl-2、Bax、Cytochrome C、Caspase9、Caspase3等线粒体细胞凋亡途径相关蛋白的表达，证明了在NaF处理后引起的细胞凋亡，表明细胞通过内质网应激—线粒体细胞凋亡途径是氟中毒诱发肝细胞凋亡的重要机制。