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目的:蛋白酶(protease)是一类催化肽键水解的酶，目前微生物来源的蛋白酶以其自身的优势和特异性在洗涤剂、皮革制备、蛋白质水解加工等行业得到了广泛的关注和应用。本实验室之前已从大庆林甸温泉水样中分离鉴定出六株Anoxybacillus属的不同种的嗜热菌，并表明其具有较好的产蛋白酶能力。因此本研究对六株嗜热菌进行高产蛋白酶菌株的筛选，并对其进行产酶条件，酶学性质研究，通过紫外诱变了解其产蛋白酶酶活力的变化，以便获得具有稳定遗传性的优良菌株，为下一步进行蛋白酶基因的克隆、表达及开发应用提供依据。 方法:本实验对已从大庆林甸温泉水样中分离鉴定出的六株Anoxybacillus属的嗜热菌进行常规方法液体培养细菌，然后用牛奶平板筛选出透明圈与菌落直径比值较大的菌株，研究温度、pH值、培养基中碳源、氮源对菌株产蛋白酶的影响，用硫酸铵盐析的方法提取酶液，并采用福林法测酶活性。用紫外分光光度计在OD680 nm测吸光值。并对提取的蛋白酶液进行酶的最适温度、pH以及酶的热稳定性和pH稳定性研究，向酶液中添加金属离子和EDTA、PMSF，研究其对酶活性的影响。对菌株进行紫外诱变，在紫外灯的照射下照射0秒、30s、60s、90s、120s、150s每次取样稀释后涂平板培养，通过平板上生长的菌落数计算出致死率。通过致死率选择最佳照射时间诱变菌株，并比较紫外照射前后酶活力的变化，诱变菌株连传5代，观察其产蛋白酶遗传稳定性。 结果:嗜热菌Anoxybacillus sp.D3在牛奶平板上透明圈与菌落直径比值最大，显示此菌株产蛋白酶能力较强。在培养基初始pH6.5，培养温度为40℃时菌株产酶酶活力最高;培养基中以乳糖为碳源，酵母膏和硫酸铵为氮源时，酶活力最大。酶学性质研究结果显示:该酶的最适反应温度是55℃，最适反应pH是7.0;此酶具有较好的热稳定性和pH耐受性，Fe2+、Cu2+和Hg2+对酶活性有明显的抑制作用;Ca2+、Mn2、+Mg2+对酶活性的促进作用很是明显;苯甲基磺酰氟(PMSF)和EDTA对酶活力也有一定抑制作用。对菌株进行紫外诱变，当照射时间为90秒时，致死率为81.46％，测得的酶活力为28U/mL，未经紫外线照射处理的菌液，测得的酶活力为23.3U/mL，诱变菌株蛋白酶活力比无诱变菌株提高了20.17％。对菌株连续传代5次，其蛋白酶活力基本稳定。 结论:Anoxybacillus sp.D3所产的蛋白酶为嗜热中性蛋白酶，此酶具有较好的热稳定性和pH耐受性，金属离子对蛋白酶活力有促进作用，该菌株经紫外诱变后，蛋白酶活力显著提高，诱变菌株有较好的遗传稳定性，该菌株具有进一步开发、应用的价值。