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少孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora)可产生三维菌网来捕获线虫,是捕食线虫真菌中常用的研究模式。本文主要研究了少孢节丛孢在线虫的刺激下形成三维菌网并侵染线虫的过程中糖原、三脂酰甘油的累积和降解以及其代谢途径相关基因的变化规律。敲除糖原代谢的相关基因糖原磷酸化酶gph1对真菌形成三维菌网和侵染线虫的影响,并确定gph1基因对少孢节丛孢杀线虫的影响。
本论文的结果主要有以下几点:
1.在线虫诱导Arthrobotrysoligospora24小时后,gph1基因的表达量升高。
2.敲除gph1基因以后测定少孢节丛孢从孢子萌发到捕器形成中的糖原变化,发现gph1敲除型出现糖原累积的现象。
3.敲除gph1以后,产孢率明显的下降,孢子萌发没有变化,捕器的生成也没有变化,但是真菌对线虫毒力下降。
4.用尼罗红对少孢节丛孢从孢子萌发到菌丝以及菌丝到捕器的过程进行染色,发现捕器中三脂酰甘油的累积量相对增加。
本论文的创新主要体现在如下几个方面:
1.首次研究了少孢节丛孢的代谢产物糖原在侵染线虫的过程中的变化。
2.首次研究了糖原磷酸化酶gph1在少孢节丛孢侵染线虫过程中该基因的表达变化,以及该基因在少孢节丛孢捕获线虫中的作用。