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动物卵母细胞是母系遗传信息的载体,为早期胚胎发育提供材料;也是卵泡生长发育的驱动器和中心调控点,其发育情况与表型变异对性成熟、排卵和早期胚胎发育等生理过程起关键调控作用。
本研究主要针对猪卵母细胞有别于其他动物的独特表型——脂质含量丰富,进行分子调控机制研究。猪卵母细胞中的脂质主要以脂滴的形态存在,本研究通过苏丹Ⅲ和油红O对脂质进行特异性染色,发现大量的脂滴弥散分布于猪卵母细胞中,几乎充满整个细胞质,以致无法分辨细胞核与其他细胞器。
随后采用Agilent全基因组表达谱芯片分析猪卵母细胞-卵丘细胞复合体的基因转录情况,并筛选脂质相关基因与八个不同部位脂肪组织进行表达差异分析,发现1820个猪脂质相关基因转录本中只有1561个在卵母细胞中表达,根据表达量可以将其聚为四类。分别是极高丰度表达(Cluster1,平均表达量18.05)、高丰度表达(Cluster2,平均表达量14.43)、中等丰度表达(Cluster3,平均表达量9.96)和低丰度表达(Cluster4,平均表达量5.82)。背膘上层与卵母细胞差异基因数为620,其中284个上调,336个下调;背膘下层与卵母细胞差异基因数594,其中297个上调,297个下调;大网膜与卵母细胞差异基因数618,其中323个上调,295个下调;小网膜与卵母细胞差异基因数617,其中313个上调,304个下调;板油与卵母细胞差异基因数615,其中319个上调,296下调;腹脂与卵母细胞差异基因数597,其中300个上调,297个下调;肌间脂肪与卵母细胞差异基因数.549,其中334.个上调,315个下调;心包脂肪与卵母细胞差异基因数493,其中292个上调,201个下调。这些基因主要分布在脂质代谢、脂肪酸合成与代谢、细胞内脂质代谢及脂质结合等Go term功能分类中。此外发现21个卵母细胞特异性表达的基因。其中12个基因在卵母细胞中表达量特异性上调,9个基因特异性下调,这些基因分布于9个细胞脂质相关的Go term功能分类中。提示可以将这些基因作为猪卵母细胞脂质调控的重要候选基因进行深入研究。以上结果有助于揭示猪卵母细胞高脂质含量性状的分子调控机制,为明确猪卵母细胞脂质沉积、脂肪代谢的独特模式提供重要的基础数据。