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1目的通过温阳补肾方治疗兔激素性股骨头坏死的研究,观察血清OPG、BGP、PINP,及股骨头组织中VEGF、TGF-β1的表达。通过光学显微镜及透射电镜来观察股骨头组织病理改变及细胞的超微结构,从而探讨温阳补肾方防治激素性股骨头坏死的作用机制。2方法2.1新西兰兔随机分为正常组与模型组,模型组运用改进马血清联合甲强龙造模法,建立激素性股骨头坏死模型,检测相关指标鉴定模型。2.2造模成功后将模型组再次分为四组：模型组、低、中、高剂量治疗组,治疗组用温阳补肾方进行灌胃4周、8周、12周。2.34周、8周、12周后,分别取动物血清及股骨头组织冻存待测。2.4用酶联免疫法检测血清OPG、BGP、PINP的含量。2.5用HE染色法进行组织形态学观察及空骨陷窝率的检测。2.6根据血清OPG、BGP、PINP的含量对比,组织形态学观察及空骨陷窝率的比较,选择变化最明显的时间点,对该时间点所冻存的股骨头组织运用透射电镜进行细胞超微结构观察。运用Western-blot法检测股骨头组织中VEGF、TGF-β1的表达。3结果3.1模型鉴定造模完成后,模型组动物与正常组对比：大体外观、股骨头组织形态及空骨陷窝率都有明显差异,提示造模成功。3.2HE染色结果4周、8周、12周模型组与正常组比较：股骨头组织形态改变明显差异,空骨陷窝率差异显著(P<0.01)。各时间点内,温阳补肾方各剂量治疗组空骨陷窝与模型组相比都明显降低(P<0.01)。3.3酶联免疫法检测血清OPG、BGP、PINP含量4周、8周、12周模型组OPG、 BGP、PINP含量明显低于正常组(P<0.01)。4周时：低剂量治疗组与模型组比较BGP、PINP含量无显著差异(P>0.05),OPG含量有所升高(P<0.05)。中、高剂量治疗组与模型组比较OPG、BGP、PINP含量明显升高(P<0.01)。8周时：低、中、高剂量治疗组与模型组比较OPG、BGP、PINP含量有明显升高(P<0.01)。12周时：低、中、高剂量治疗组与模型组比较OPG、BGP、PINP含量有明显升高(P<0.01)。各时间点内,低、中剂量治疗组对比,OPG、BGP、PINP含量有差异(P<0.05)。各时间点内,中、高剂量治疗组对比,OPG、BGP、PINP含量无明显差异(P>0.05),除第12周时,中剂量与高剂量治疗组OPG有明显差异(P<0.01)。3.4透射电镜观察模型组与正常组对比,软骨细胞及骨细胞超微结构对比差异明显。与模型组相比温阳补肾方各剂量治疗组细胞结构都有所好转。3.5Western-blot检测骨组织中VEGF、TGF-β1的表达模型组VEGF、TGF-β1的表达明显低于正常组(P<0.01)。各剂量治疗组VEGF、TGF-β1的表达明显高于模型组(P<0.01)。中剂量治疗组VEGF、TGF-β1的表达高于低剂量治疗组(P<0.05)。而中、高剂量治疗组对比无明显差异(P>0.05)。4结论4.1温阳补肾方促进血清OPG、BGP、PINP含量增加,提示其可以提高成骨细胞活性,促进骨生长。4.2温阳补肾方抑制骨髓内脂肪细胞肥大坏死,抑制脂质在髓腔内大量堆积。4.3温阳补肾方提高坏死股骨头组织中VEGF的表达,促进血管新生,从而增加股骨头坏死区的血供。4.4温阳补肾方中、高剂量组效果明显优于低剂量组,中、高剂量组效果相当。