【摘 要】
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该文研究了重组大肠杆菌发酵和提高rhIL-6表达的工艺:在2×YT培养基中,30℃培养菌密度OD值约为1.5时,升温至42℃或40℃诱导1h,然后降低温度至37℃培养3h后终止发酵,rhIL-6的
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该文研究了重组大肠杆菌发酵和提高rhIL-6表达的工艺:在2×YT培养基中,30℃培养菌密度OD<,600>值约为1.5时,升温至42℃或40℃诱导1h,然后降低温度至37℃培养3h后终止发酵,rhIL-6的表达量达到32%,而在单温40℃或42℃诱导的情况下,表达量仅为20%左右.采用均匀设计法,研究培养基成分对rhIL-6表达的影响,并运用人工神经网络技术重组hIL-6大肠杆菌发酵培养进行模拟、预测和优化.从而得到了适于rhIL-6高表达的最佳培养基组成:胰蛋白胨0.8g/L、酵母提取物0.8g/L、葡萄糖5.5g/L、NaCl、3.0g/L、NaH<,2>PO<,4>13.0g/L、K<,2>HPO<,4>5.5g/L、MgSO<,4>0.45g/L,并在10升发酵罐中得到验证,从而说明人工神经网络预测值与实验值吻合较好.调整所得优化培养基在10L发酵罐中进行了流加补料尝试,得到了rhIL-6表达量较高的补料方式.
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