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在哺乳动物中，核转录因子NF-κB是一类最常见、含量最丰富的核转录因子，NF-κB可被多种刺激因素激活，包括:基因毒性、炎症因子以及氧化应激。在肿瘤的发生发展中，活化的NF-κB与多种细胞过程相关，包括:炎症、转化、细胞增殖、血管增生、细胞侵袭、转移以及化学抵抗和抗辐射性。因此，化疗药物对NF-κB的抑制可作为治疗肿瘤的潜在治疗手段。黄芩素是从中国药用植物黄芩的全草、根茎中提取出来的黄酮类化合物。已报道黄芩素具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗焦虑以及神经保护等生物活性。本实验主要针对黄芩素以NF-κB为靶点的抗炎抗肿瘤活性及其作用机制进行研究。 首先，通过荧光素酶报告基因实验检测黄芩素对NF-κB转录活性的作用。发现在TNF-α刺激下，黄芩素可浓度依赖型抑制NF-κB转录活性。MTT实验证明了黄芩素对HeLa细胞没有明显的细胞毒性。通过免疫印迹法检测了黄芩素对IκBα、p-IκBα、p65蛋白表达的作用。结果发现，黄芩素可以通过抑制细胞质内IκBα的磷酸化与降解来抑制HeLa细胞中TNF-α刺激下p65的核转移。通过免疫荧光法再次验证了黄芩素能显著抑制TNF-α刺激下p65进入细胞核，从而抑制了NF-κB与其启动子的结合。通过免疫印迹法检测黄芩素对NF-κB下游靶蛋白作用。结果表明，黄芩素可以显著的降低TNF-α刺激下，抗凋亡蛋白(cIAP-1、cIAP-2、FLIP、BCL-2)、周期蛋白(Cyclin D1、COX-2)、炎症因子IL-8、趋化因子MCP-1、周期相关蛋白c-Myc、侵袭蛋白MMP-9以及血管形成蛋白VEGF的表达。通过流式细胞仪检测黄芩素对HeLa细胞凋亡的作用，结果表明黄芩素能促进TNF-α刺激下的细胞凋亡。通过免疫印迹法证明黄芩素是通过促进凋亡相关蛋白caspase-8和PARP的降解，从而促进HeLa细胞凋亡。通过MTT法证明了黄芩素能显著抑制HeLa细胞的增殖。又利用流式细胞仪检测黄芩素对细胞周期的影响。实验表明，黄芩素使HeLa细胞停滞在G1期。说明黄芩素抑制HeLa细胞的增殖是通过抑制细胞周期进程来调控的。通过免疫印迹法检测黄芩素对 MAPK信号通路的作用。结果表明，黄芩素能显著抑制TNF-α刺激下MAPK信号通路中p-p38、p-ERK的表达，而对p-JNK没有影响。 综上所述，黄芩素可以有效地抑制NF-κB及其下游靶蛋白的表达，进而抑制宫颈癌的发生与发展。