【摘 要】
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目的:研究缺氧对神经元细胞及心肌细胞内游离铁含量的影响,观察细胞铁代谢蛋白的表达。
方法:用原代培养的Wistar乳鼠神经元细胞和H9c2细胞(一种大鼠心肌细胞系)建立体
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目的:研究缺氧对神经元细胞及心肌细胞内游离铁含量的影响,观察细胞铁代谢蛋白的表达。
方法:用原代培养的Wistar乳鼠神经元细胞和H9c2细胞(一种大鼠心肌细胞系)建立体外细胞缺氧模型。MTT法检测缺氧不同时间细胞活力变化,激光扫描共聚焦显微镜检测缺氧不同时间细胞内游离铁含量变化,Western blotanalysis检测铁代谢相关蛋白:转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)和铁转运蛋白(ferroportinl,FP1)表达变化。
结果:1.缺氧导致神经元细胞活力下降,在缺氧16、24h时有统计学意义(P＜0.05);同样缺氧引起H9c2心肌细胞活力下降,且在缺氧4、10、16、24h均有统计学意义(P＜0.05),证明缺氧对两种细胞的损伤作用,也表明在此试验条件下,H9c2细胞比神经元细胞对缺氧反应更为敏感。2.缺氧导致神经元细胞及H9c2细胞内游离铁含量增加,缺氧4、10、16、24h时,两种细胞内游离铁含量显著增加(P＜0.05),证明缺氧导致神经元细胞及心肌细胞内游离铁的大量蓄积,可能为导致神经元细胞及心肌细胞进一步损伤的原因。3.神经元细胞的转铁蛋白受体在缺氧24h表达明显增加(P＜0.05),而铁转运蛋白在缺氧10h时表达明显增加(P＜0.05),提示它们可能参与了神经元细胞缺氧后细胞内游离铁含量增加的调节。
结论:缺氧致神经元细胞和心肌细胞损伤的同时伴随细胞内游离铁的升高这可能是导致细胞进一步损伤的机制之一;铁代谢蛋白可能参与了铁紊乱的调节。
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