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目的CD40、CD40L、OX40是表达于人类多种免疫细胞表面的共刺激分子。由于它们的相互作用刺激了B细胞、树突状细胞和单个核细胞等免疫细胞的分化、增殖、共刺激分子的表达及抗原提呈功能,所以被认为在机体的免疫过程中起着重要的作用。随着人类对CD40、CD40L、OX40的基因结构和功能的深入认识,它们在白血病治疗中的作用受到人们的关注。本文研究了急性髓性白血病(AML)白血病细胞的CD40、CD40L、OX40抗原表达与AML患者临床特征之间的关系,同时探讨了它们与白血病相关基因表达是否有联系,从而为以后的白血病治疗提供一定的科学依据。方法我们收集了健康者骨髓样本5例和病例组骨髓样本46例未经治疗的初诊急性髓性白血病患者(来自山西医科大学第二临床医学院血液科及山西省第二人民医院血液科经FAB分型确诊的病人),应用流式细胞仪检测骨髓单个核细胞表面CD40、CD40L、OX40的表达和利用RT-PCR方法检测骨髓单个核细胞Bcl-2、Bcl-xL mRNA的表达。结合AML患者的临床特征,利用统计学方法(SPSS统计软件)分析CD40、CD40L和OX40在AML患者白血病细胞上的表达以及其与AML患者临床特征之间的关系,同时探讨它们与白血病相关基因表达的相关性。结果1 46例AML患者中仅表达CD40抗原的有9例(17.4%),单独表达CD40L抗原的有2例(4.3%),仅表达OX40抗原的有1例(2.1%),表达CD40+CD40L+OX40~-的患者有7例(15.2%),表达CD40+CD40L+0X40+的患者有11例(23.9%),表达CD40~+CD40L~-OX40~+的患者有1例(2.1%),而表达CD40~-CD40L.+OX40~+的患者为0例,三种抗原全部不表达的患者有15例(32.6%)。总体分析CD40~+表达的患者有28例(60.9%),CD40L~+的患者有20例(43.6%),OX40~+的患者有13例(28.3%)(抗原表达≥0.20为阳性标准)。2 46例AML患者中全部有贫血的症状,20例有出血的症状,肝脏大和胸骨压痛者同时存在14例,血小板减低(≤50x10~9/L)的患者有22例,有脾大和高白细胞表现现(≥100x10~9/L)的患者分别有19例和14例。3由于仅表达OX40的患者组、单独表达CD40L的患者组、表达CD40~-CD40L~+OX40~+的患者组和表达CD40~+CD40L~-OX40~+的患者组例数比较少,因此在组间比较时将这四组数据去除,只余下四组,分别是仅表达CD40的患者组(①组)、表达CD40~+CD40L~+OX40~-的患者组(②组)、三种抗原全部表达组(③组)和全部不表达组(④组)。这四组比较(组间比较的χ~2分割法,α′=0.00714,χ~2=7.24)结果显示:在有高白细胞表现的患者中,四组总体比较有差别(P＜0.001),且②组的发病率(100%)明显高于①组(22.2%)、③组(9.1%)、④组(26.7%)(χ~2=9.679,χ~2=14.318,χ~2=10.267);在有血小板减少表现的患者中,四组总体比较有差别(P=0.001),①组的发病率(100%)明显高于④组(33.3%)、③组(36.4%)、②组(28.6%)(χ~2=10.286,χ~2=8.811,χ~2=9.351);最后在有脾大表现的患者中,四组总体比较也有差别(P=0.002),④组的发病率(6.7%)明显低于①组(66.7%)、②组(71.4%)、③组(54.5%)(χ~2=9.802,χ~2=10.092,χ~2=7.394)。4 46例AML患者中23例(50%)高表达Bcl-2基因(0.617±0.096),20例(43.6%)高表达Bcl-xL基因(0.498士0.067)(Bcl-2≥0.60和Bcl-xL≥0.50为高度表达)。正常对照组5例样本均没有表达着两种基因。5①、②、⑧和④组组间比较(方差的两两比较)结果:①组Bcl-2、Bcl-xL的表达水平低于②、③组Bcl-2、Bcl-xL的表达水平;②组、⑧组Bcl-2、Bcl-xL的表达水平高于④组Bcl-2、Bcl-xL的表达水平。结论在此有限的实验中可以说明CD40、CD40L、OX40抗原的表达和AML的临床血液学特征存在一定关系,并与白血病相关基因Bcl-2、Bcl-xL的表达有关。CD40、CD40L的同时表达可能刺激OX40的表达,而CD40的表达可能刺激CD40L的表达。CD40的表达能增加患者伴有脾大表现的可能性,这与刺激了机体的免疫反应有关。CD40的单独表达可能使白血病患者血小板的降低更加严重,其他研究者认为可能与伴有CD30L的表达有关;并且当合并CD40L表达时,会减少血小板低下的发生率,说明CD40L在此方面起到了一定的保护作用,考虑是否由于CD40L的表达拮抗了CD40的作用。在只有CD40与CD40L同时表达时,高白细胞表现的发生率明显高于其他各组,说明CD40与CD40L之间的相互作用可以刺激白血病细胞的增殖,与它们可以提高白血病细胞Bcl-2和Bcl-xL的表达有关,而OX40则可能起了保护作用,从而抵消了CD40与CD40L相互作用引起的白血病细胞增殖,但它并没有影响了Bcl-2和Bcl-xL的表达,应该另有保护机制。