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本工作涉及两个中药品种:绵马贯众(Rhizoma Dryopteridis Crassirhizomatis)与粗茎秦艽(Radix Gentianae Crassicaulis);包括六章内容:第一章:绵马贯众品种鉴定;第二章:绵马贯众药材TLC指纹图谱研究;第三章:粗茎秦艽品种鉴定;第四章:粗茎秦艽药材HPLC指纹图谱研究;第五章:粗茎秦艽药材中龙胆苦苷的含量测定;第六章:粗茎秦艽药材TLC指纹图谱研究。
一、贯众类品种鉴定
经野外考察,标本采集与分类学鉴定,确定绵马贯众原植物的系统位置为鳞毛蕨科粗茎鳞毛蕨Dryopteris crassirhizoma Nakai;并对其它混淆品基原进行了分类学鉴定。
二、绵马贯众药材TLC指纹图谱研究
采用TLC法,对9批市售绵马贯众药材和1批绵马贯众标准对照药材建立了绵马贯众药材TLC指纹图谱,找到了绵马贯众药材指纹区的5个指纹峰;10批绵马贯众药材指纹区的5个指纹峰Rf值的RSD都小于5%。而在该色谱条件下,4个阴性对照药材紫萁贯众(Osmunda japonica Thunb.)、狗脊贯众(Woodwardia japonica(L.f.)Sm.)、小贯众(Cyrtomium fortunei J.Sm.)及狭项鳞毛蕨(Dryopteris lacera(Thunb.)O.Ktze.)没有绵马贯众指纹区的此组指纹峰。因此,建立的指纹图谱能有效地将绵马贯众药材与上述混淆品以及粗茎鳞毛蕨同属近缘种狭顶鳞毛蕨区别开来。
三、粗茎秦艽品种鉴定
经野外考察,标本采集与分类学鉴定,确定其系统位置为龙胆科龙胆属植物粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.。
四、粗茎秦艽药材HPLC指纹图谱研究
采用HPLC法,对13批不同产地的粗茎秦艽药材建立了粗茎秦艽药材HPLC指纹图谱。以龙胆苦苷为参照,共标定10个峰为共有峰,建立了共有模式。经国家药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价软件评价,相关系数在0.98以上。进行方法学考察,结果表明精密度、重现性良好,样品在24小时内稳定。
我们还应用HPLC法将粗茎秦艽与麻花艽(Gentiana straminea Maxim.)及市售龙胆药材的化学背景进行初步分析,结果显示它们在大极性段的化学成分比较接近。
五、粗茎秦艽药材中龙胆苦苷的含量测定
采用HPLC法,以龙胆苦苷为对照品,分别对10批丽江产粗茎秦艽栽培品与3批野生品进行含量测定。2005年版中国药典规定秦艽药材中龙胆苦苷含量不得低于2%,测定结果表明,13批不同产地粗茎秦艽药材均达到要求,10批丽江产粗茎秦艽栽培品所含龙胆苦苷的量均比药典规定高出1倍以上,初步推断该药材品质良好。
六、粗茎秦艽药材TLC指纹图谱研究
采用TLC法,对13批不同产地的粗茎秦艽药材建立了粗茎秦艽药材TLC指纹图谱。以栎樱酸为参照,找到了粗茎秦艽药材指纹区的7个指纹峰,13批不同产地粗茎秦艽药材的指纹区7个指纹峰Rf值的RSD都小于2%。我们还应用TLC法将粗茎秦艽与麻花艽、龙胆进行对比,结果显示龙胆药材中不含有栎樱酸成分,而麻花艽和粗茎秦艽中均含有,此成分有可能作为龙胆和秦艽类中药的鉴别点。