论文部分内容阅读
日本血吸虫腺苷酸琥珀酸合成酶(SjADSS)是其嘌呤补救合成途径中的关键酶，已被预测为潜在药物靶点；并经过蛋白同源建模、计算机小分子化合物虚拟筛选得到了可与SjADSS特异性结合的22个化合物。
本研究首先通过体外培养日本血吸虫技术，对这些预测可与SjADSS特异性结合的化合物进行了体外抗日本血吸虫活性测试，建立了抗日本血吸虫药物体外筛选平台，为更多的抗血吸虫药物的体外筛选提供了基础。随后对SjADSS基因进行了生物信息学分析，克隆、表达、纯化及鉴定。在此基础上，利用荧光免疫定位技术对SjADSS在虫体内的定位进行了研究，对SjADSS免疫学功能以及不同虫期的表达情况进行了探讨。结果发现，有3个化合物，在体外培养的3d内可造成血吸虫的部分死亡，SjADSS主要定位于虫体的实质组织。动物保护性试验表明，用重组SjADSS蛋白免疫小鼠，可诱导产生19.8％的减虫率和25.6％的减卵率。实时荧光定量PCR的结果提示，SjADSS的表达存在着虫期差异性，在成虫及虫卵期的表达量均为尾蚴期的2倍以上。