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目的：进一步确证CVB3VP1与宿主蛋白MAT1存在相互作用，研究VP1与MAT1相互作用对CAK活性的影响，为深入认识CVB3的分子致病机制奠定良好的基础。方法：1.用MOI=5的CVB3感染HeLa细胞3h，于相应细胞的蛋白裂解液中，一方面加入anti-MAT1来沉淀VP1蛋白，另一方面加入anti-VP1来沉淀MAT1蛋白，采用免疫共沉淀技术检测VP1与MAT1蛋白的表达；2. CVB3感染HeLa细胞0h、3h、6h、9h及质粒pBudCE4.1-VP1转染HeLa细胞12h、18h、24h后，收集各时间点细胞，采用免疫荧光双标技术，用Rhodamine-驴抗小鼠二抗（红色荧光）与鼠抗VP1单抗的特异结合来显示VP1在细胞中的定位，用Alexa Flour488驴抗山羊二抗（绿色荧光）与山羊抗MAT1的特异性结合来显示MAT1在细胞中的定位，用激光共聚焦显微镜观察VP1与MAT1的亚细胞共定位现象；3.质粒pBudCE4.1-VP1转染HeLa细胞12h、18h、24h及CVB3感染HeLa细胞0h、3h、6h、9h后，收集各时间点胞浆、胞核蛋白，采用Western blotting技术检测其中MAT1、CDK7及Cyclin H表达量的变化：；4.质粒pBudCE4.1-VP1转染HeLa细胞12h、24h、36h后，提取细胞蛋白，于其中加入anti-MAT1来沉淀CDK7蛋白，采用免疫共沉淀技术分析CAK复合物中CDK7的表达变化；5.质粒pBudCE4.1-VP1转染HeLa细胞12h、18h、24h及CVB3感染HeLa细胞0h、3h、6h、9h后，收集各时间点胞浆、胞核蛋白，采用Western blotting技术分析RNAPol II CTD与p-RNAPol II CTD的表达变化。结果：1.在CVB3感染后的HeLa细胞蛋白中，VP1能被anti-MAT1共沉淀，同时MAT1能被anti-VP1共沉淀。这表明，病毒感染后的细胞内，VP1与MAT1可以发生相互作用；2.在CVB3感染组及质粒pBudCE4.1-VP1转染组中均观察到VP1与MAT1在细胞浆中存在共定位现象，且病毒感染细胞后6h及9h，这种现象更为明显；3.随着质粒pBudCE4.1-VP1转染及CVB3感染时间的延长，细胞总蛋白中MAT1与CDK7表达量逐渐下调，Cyclin H表达无明显变化趋势；4.随着质粒pBudCE4.1-VP1转染时间的延长，CAK复合物中CDK7的表达逐渐地下调；5.随着质粒pBudCE4.1-VP1转染及病毒感染时间的延长，胞核蛋白中RNA Pol II CTD及p-RNA Pol II CTD的表达量逐渐下调。结论：1.进一步确证了CVB3VP1与宿主蛋白MAT1存在相互作用；2. VP1与MAT1的相互作用引起CDK7表达量下调以及CDK7对RNA Pol II CTD磷酸化功能下调，导致CAK活性下降。