论文部分内容阅读
随着生活方式和饮食结构的变化，肝脏发病率呈逐年上升趋势，严重的威胁了人类的健康。因此，找到一种行之有效的药物降低肝病发生率尤为重要。 目的：试验通过建立动物肝损伤模型，以葛根、丹参和枳棋子为方剂的复方中药提取液为研究对象，对动物肝损伤模型进行治疗，并与模型对照组和空白对照组比较，旨在观察复方中药提取液对动物肝损伤的作用效果。 方法：试验选取雄性昆明小鼠作为试验动物，以一定量四氯化碳(CCl4)、对乙酰氨基酚(APAP)和饮用酒建立不同因素小鼠肝损伤模型，并筛选出最佳的造模剂量。依据造模剂量进行三因素肝损伤试验，各因素肝损伤试验均选取大小、状态相近的小鼠90只，其中15只为空白对照组，剩余75只分别按造模制剂及剂量给小鼠进行灌胃。化学性肝损伤和药物性肝损伤灌胃5周，酒精性肝损伤灌胃6周，2次/d，然后分别从各肝损伤模型中随机抽取5只小鼠进行AST和ALT含量的检测，依据检测结果，及肝脏外形和组织切片的变化，确定其造模是否成功。各因素肝损伤模型造模成功后，将模型组小鼠分别分为阳性对照组、模型组对照组、药物对照组（低、中、高剂量组）5组，每组10只小鼠，其中化学性肝损伤的阳性对照组采用联苯双脂滴丸150mg/kg灌胃，药物性肝损伤阳性对照组采用硫普罗宁500mg/kg灌胃，酒精性肝损伤阳性对照组采用复方蛋氨酸胆碱片540mg/kg灌胃，药物试验组分别按照10mL/kg的剂量灌胃，其浓度分别为0.25g/mL、0.5g/mL、1g/mL，空白对照组和模型对照组给予相应体积的蒸馏水灌胃，2次/天，共给药30d。末次给药结束后禁食不禁水24h，最后采用摘除眼球法取血并处死动物，通过检测三种因素肝损伤试验组小鼠的血清转氨酶（ALT和AST）、肝组织抗氧化能力(SOD、GSH、GSH-Px)、肝组织中有毒物质MDA的含量、肝组织中CYP2E1mRNA表达量，以及小鼠的肝脏指数和小鼠的肝脏病理切片，同时药物性肝损伤，还需检测肝组织中NO的含量，酒精性肝损伤还需检测肝组织中ADH和ALDHmRNA的表达量、血清中脂质(TG、TC)的变化，最后依据试验结果综合评价试验药物对小鼠肝损伤的保护作用，同时观察药物对小鼠的急性毒性反应，初步评价药物的安全性。 结果： 1、在化学性肝损伤试验中，与模型对照组相比，各剂量药物组在肝脏指数、ALT、AST、SOD、GSH、GSH-Px、MDA含量及CYP2E1mRNA表达量等指标上差异极显著(P＜0.01)，表明各剂量药物对CCl4所造成的肝损伤均具有一定修复作用，其中，高剂量药物组与空白对照组相比，在肝脏指数、ALT、AST、SOD、GSH、GSH-Px、MDA等指标上，差异不显著（P＞0.05），且从各项损伤指标及切片上可以看出，高剂量药物组能使受损伤肝组织细胞基本可以恢复到未受损伤状态。同时与阳性对照组相比，高剂量药物组在肝脏指数、ALT、SOD、GSH、GSH-Px含量变化等影响指标方面，差异显著(P＜0.05)，说明高剂量药物组在通过提高SOD、GSH、GSH-Px含量，降低ALT含量，等机制对肝损伤组织修复能力要高于阳性药物。 2、在药物性肝损伤试验中，与模型对照组相比，各剂量药物组在肝脏指数、ALT、AST、SOD、GSH、GSH-Px、MDA、NO含量及CYP2E1mRNA表达量等指标上差异极显著(P＜0.01)，表明各剂量组药物对APAP所造成的肝损伤均具有一定修复作用，其中，高剂量药物组与空白对照组相比，在肝脏指数、ALT、AST、GSH-Px、MDA、NO含量及CYP2E1mRNA表达量等指标上，差异不显著(P＞0.05)，且从各项损伤指标及切片上可以看出，高剂量药物组能使受损伤肝组织细胞基本可以恢复到未受损伤状态。同时与阳性对照组相比，高剂量组在肝脏指数、ALT、GSH-Px含量变化及CYP2E1mRNA表达量等影响指标方面，差异显著(P＜0.05)，说明高剂量药物组在通过提高GSH-Px含量，降低ALT含量，以及下调CYP2E1mRNA表达量等机制对肝损伤组织修复能力要高于阳性药物。 3、在酒精性肝损伤试验中，与模型对照组相比，各剂量药物组在肝脏指数、ALT、AST、SOD、GSH、GSH-Px、MDA、TC、TG含量等指标上差异极显著(P＜0.01)，且中、高剂量药物组在CYP2E1mRNA表达量及ADHmRNA表达量上差异显著(P＜0.05)，低剂量药物组在ALDHmRNA表达量上差异极显著(P＜0.01)，表明各剂量药物对酒所造成的肝损伤均具有一定修复作用，其中，高剂量药物组与空白对照组相比，在肝脏指数、AST、SOD、GSH、MDA、TC和TG含量等指标上，差异不显著(P＞0.05)，且从各项损伤指标及切片上可以看出，高剂量药物组能使受损伤肝组织细胞基本可以恢复到未受损伤状态。同时与阳性对照组相比，高剂量药物组在肝脏指数、AST、MDA、SOD、GSH、TG、TC含量及CYP2E1mRNA和ADHmRNA表达量等影响指标方面，差异显著(P＜0.05)，说明高剂量药物组在通过提高降SOD、GSH含量及ADHmRNA表达量，降低AST、MDA、TG、TC的含量，以及下调CYP2E1mRNA表达量等机制对肝损伤组织修复能力要高于阳性药物。 结论：综合各试验结果，高剂量药物组能降低CCl4、APAP及酒精性肝损伤组织中AST、MDA含量，同时增加GSH的含量。此外，高剂量药物还能降低APAP血浆中NO含量，及酒精性肝损伤TC、TG含量。