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目的：
1.采用UPLC-MS/MS法同时测定半夏泻心汤中黄酮、生物碱、皂苷类共12介组分含量，并检测各组分在不同配伍中的变化情况。
2.建立多组分分析测试方法，分析全方及不同配伍组中化学成分群在体内外、血药、尿药浓度变化，研究半夏泻心汤多组分在大鼠体内的吸收和排泄变化规律，为阐明其药效物质基础提供理论依据。
方法：
1.半夏泻心汤的UPLC-MS/MS分析
本实验对UPLC液相方法中流动相梯度、添加物、流速、柱温以及质谱条件中各化合物裂解电压和碰撞能量进行优化，确定以甲醇：0.1％甲酸和5mmol/L醋酸铵水溶液为流动相梯度洗脱，质谱采用正离子模式，选择离子反应监测(SRM)对半夏泻心汤中12个有效组分进行含量测定。
2.半夏泻心汤多组分血药动力学研究
大鼠灌胃给予半夏泻心汤(20g/kg)及不同配伍组，给药前及给药后不同时间点采集血样300uL，以甲醇沉淀蛋白后丙酮-乙酸乙酯(1:1)提取血浆中待测组分，在体外多组分UPLC-MS/MS分析的基础上，内标法研究全方及不同配伍中各化学组分在大鼠体内血药浓度的变化。
3.半夏泻心汤多组分尿药动力学研究
大鼠灌胃给予半夏泻心汤(20g/kg)及不同配伍组，给药前及给药后0～72h不同时间段采集尿液样品。取尿液样品150μuL，分别在酸化和碱化处理后用乙酸乙酯进行提取尿液样品中的黄酮和生物碱组分。UPLC-MS/MS分析全方及不同配伍组中化学成分在大鼠体内尿药浓度的变化。
结果：
1.建立了半夏泻心汤UPLC-MS/MS联用的检测方法，同时对复方中12个有效组分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、甘草苷、黄连碱、药根碱、巴马汀、小檗碱、甘草酸、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1)进行了含量测定，方法特异性强，快速、准确。结果表明汤剂中黄芩苷、汉黄芩苷、小檗碱和甘草苷的含量占前四位；全方组和苦降组、甘补组经方差分析比较无显著性差异(P＞0.05)。
2.利用UPLC-MS/MS法获得半夏泻心汤在大鼠体内7种有效成分的血药浓度-时间曲线，各组分药动学参数经DAS2.0软件拟合。结果表明，汉黄芩素和甘草苷符合一房室药动学模型，甘草苷在甘补组中消除较快；人参皂苷Rb1符合二房室开放模型，半衰期达9h；黄芩苷、汉黄芩苷和小檗碱均出现多峰现象，体内发生多种转化，全方和苦降组药动学参数无显著性差异(P＞0.05)；甘草次酸在大鼠血浆中有大量检出，甘补组中浓度高于全方组(P＜0.05)。比较不同配伍的药动学参数，提示配伍对复方中甘草苷和甘草次酸的吸收入血量和吸收速率有显著性影响(P＜0.05)，其余各成分在各配伍间没有显著性差异。
3.大鼠灌服半夏泻心汤全方后，0-72h内7个组分的尿药累积排泄量依次为黄芩苷＞汉黄芩苷＞黄芩素＞汉黄芩素＞小檗碱＞巴马汀＞甘草素。7个组分中黄芩素、汉黄芩素、巴马汀和小檗碱在苦降组中的排泄半衰期较长，超过12h，其余组分在全方和配伍中均为中速排泄，排泄半衰期t1/2在8h～12h。全方组与苦降组比较，巴马汀的尿排泄量占给药量比值减少具有统计学意义(P＜0.05)。黄酮类化合物中汉黄芩苷的排泄半衰期较短(＜8h)，黄芩苷和甘草素尿排泄量占给药量比值全方较配伍组减少具有统计学意义(P＜0.05)。
结论：
本方建立了准确、可靠的UPLC-MS/MS方法对半夏泻心汤及其不同配伍中生物碱类、黄酮类和皂苷类12个有效成分的分析方法。分析全方及不同配伍组中化学成分群在体内、外血药、尿药浓度变化，研究半夏泻心汤多组分在大鼠体内的吸收和排泄变化规律，为阐明其药效物质基础提供理论依据。