【摘 要】
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许多外胚层器官,如牙齿。毛发等均源于上皮组织和间充质组织。在牙胚发育过程中,上皮-间充质之间的相互作用调控其形态的发生和细胞的分化。由此推论,利用干细胞进行的牙齿器官
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许多外胚层器官,如牙齿。毛发等均源于上皮组织和间充质组织。在牙胚发育过程中,上皮-间充质之间的相互作用调控其形态的发生和细胞的分化。由此推论,利用干细胞进行的牙齿器官的再生也需要上皮源性和间充质源性的干细胞的参与。本论文的目的是探讨人表皮干细胞的成牙能力,摸索适合牙齿再生的人上皮源性细胞及再生条件,为牙齿再生的组织工程找出种子细胞和方法依据。
在本论文的研究中,分离、培养和鉴定了人的表皮干细胞,并将培养的表皮膜片结构与小鼠E13.5的具有诱导牙齿发育能力的牙胚间充质重组。重组后的嵌合体在裸鼠囊膜下能发育形成牙齿的结构,具有发育良好的牙本质;但在形态学上表皮干细胞却未分化为成熟的成釉细胞,形成的牙齿缺乏釉质。
为了进一步建立和完善牙齿再生过程中表皮干细胞作为牙上皮的技术,往嵌合体中分别添加外源生长因子FGF8、Shh、BMP4。结果发现添加FGF8生长因子的嵌合体具完整的牙冠结构(牙髓、牙本质、牙釉质以及成釉细胞);添加Shh生长因子的嵌合体跟没有添加因子的没有明显区别;添加BMP4生长因子的嵌合体骨化明显。这表明由人表皮干细胞构成的上皮组织可以支持牙齿的发育,添加上皮有关的生长因子FGF8有助于表皮干细胞牙向分化。
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