【摘 要】
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脂质体(Liosome)是一种生物模拟膜,内部有很大的水相空间,能够包裹上万个标记物分子,可以起到信号放大的作用.该文将脂质体的这一性质应用到小分子化合物分析中,建立了快速、
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脂质体(Liosome)是一种生物模拟膜,内部有很大的水相空间,能够包裹上万个标记物分子,可以起到信号放大的作用.该文将脂质体的这一性质应用到小分子化合物分析中,建立了快速、灵敏、简便的脂质体免疫分析法(LIA)测定小分子化合物的新方法.该文首先利用LIA法测定了吗啡.首先对吗啡抗体进行纯化,利用偶联试剂N-羟琥珀酰亚胺3-(2-吡啶二硫基)丙酸脂(SPDP),使之与脂质体偶联制备了标有吗啡抗体的免疫脂质体.将氯化血红素(Hemin)作为标记分子.吗啡与免疫脂质全表面的吗啡抗体反应形成免疫复合物,免疫复合物激活补体,使脂质体溶解释放出氯化血红素.氯化血红素催化对羟基苯丙酸和过氧化氢的反应.测定此反应的初速度,该速度与浓度的对数成正比.方法的检测限为40mg/ml,线性范围为0.048-9.3μg/ml.比ELISA法灵敏度高出一个数量级,对正常人血清中加入吗啡0.5μg/ml,回收率是91.9%,在正常人尿液中加入吗啡0.5μg/ml,回收率是82.8%.将苯妥英抗体通过SPDP与脂质体偶联制备了免疫脂质体,测定了苯妥英和苯妥英钠的工作曲线,其中测定苯妥英的线形范围是2~50μg/ml,检测限为4.5μg/ml.对正常人的血清进行了加样回收实验.回收率较高.此方法提供了一种简便、快速监测血清中苯妥英含量的途径.该文最后利用LIA法测定了丁草胺的工作曲线,线性范围为10pg/ml~100ng/ml,比相应的ELISA方法的灵敏度高出将近两个数量级,并在农田中采取水样,进行了回收实验.可以看出,脂质体免疫分析法是一种快速?灵敏的分析方法.具有广泛的应用前景.
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