【摘 要】
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目的:观察酪氨酸羟化酶(TH)基因修饰的温度敏感型永生化大鼠神经干细胞(RMN)于纹状体移植后对帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用.方法:体外培养鉴定RMN细胞,并用携带TH基因的逆
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目的:观察酪氨酸羟化酶(TH)基因修饰的温度敏感型永生化大鼠神经干细胞(RMN)于纹状体移植后对帕金森病(PD)模型大鼠的治疗作用.方法:体外培养鉴定RMN细胞,并用携带TH基因的逆转录病毒转导、抗性培养获得稳定表达TH的RMN-TH细胞,将其分别植入6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备的PD大鼠模型纹状体.移植后动态观察阿扑吗啡(APO)诱导的大鼠旋转行为变化;第2周、4周、8周、16周、24周进行脑组织TH免疫组化染色;高效液相色谱电化学的方法检测纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量.结果:移植细胞能在脑内存活至少达六个月;没有肿瘤形成;其在纹状体内迁移广泛.RMN-TH细胞在纹状体内TH表达稳定,并能明显改善动物的旋转行为(P<0.01),旋转圈数下降至移植前的64.17%;脑内DA及其代谢产物含量显著提高(P<0.01).结论:温控型永生化神经干细胞脑内移植后存活良好,有一定的迁移能力;其TH转基因细胞移植使大鼠PD症状明显改善,是基因治疗PD的理想基因运载细胞.
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