葡萄糖限制流加培养过程中rCHO细胞生长及代谢特性研究

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在动物细胞大规模培养过程中营养物耗竭和大量代谢副产物的积累往往是限制细胞生长密度、影响培养过程经济性的主要矛盾.葡萄糖和谷氨酰胺是主要的营养物质,本文以调控rCHO细胞的葡萄糖代谢为主要研究目标,通过批式培养和葡萄糖限制流加培养过程考察营养物消耗与细胞生长、副产物生成的关系.首先通过逐级降血清的方法实现了rCHO细胞的无血清悬浮培养,不仅消除了血清贴壁培养造成的诸多不利影响,而且为实现大规模培养rCHO细胞创造了条件.通过在2L生物反应器中进行批培养,考察了rCHO细胞生长和代谢的基本代谢状况.为了更全面地了解细胞代谢途径迁移的情况和获得更为精确的数据,通过在2L生物反应器中进行的葡萄糖限制恒速流加培养,考察了在培养过程中葡萄糖浓度对rCHO细胞生长、葡萄糖和谷氨酰胺消耗,以及副产物乳酸、氨和丙氨酸生成的影响.最后本文通过简化模型法分析了rCHO细胞在葡萄糖限制流加培养过程中葡萄糖和谷氨酰胺的代谢流分布情况,也证实了细胞代谢途径的转换.
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