【摘 要】
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目的：利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA)技术体外沉默人胶质瘤U251细胞的COX-2基因表达，探讨其对放射敏感性的影响。 研究背景 神经胶质瘤是最常见的恶性颅脑肿瘤，
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目的：利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA)技术体外沉默人胶质瘤U251细胞的COX-2基因表达，探讨其对放射敏感性的影响。 研究背景 神经胶质瘤是最常见的恶性颅脑肿瘤，也是人类最致命的癌症之一。予以手术、放疗、化疗等综合治疗后，预后仍然不良，患者的中位生存期仅有10-11个月。胶质瘤细胞对放射治疗的抗拒，是影响其预后的重要原因之一。故如何提高胶质瘤的放射敏感性，降低肿瘤复发率已成为胶质瘤治疗的重点。COX-2是当今研究与放疗敏感性相关得热门靶点之一，已被证实与癌症相关，辐射会诱导COX-2基因表达。 方法 体外培养胶质瘤U251细胞，使用siRNA技术构建U251细胞COX-2基因沉默模型，Western blot检测转染后胶质瘤U251细胞的COX-2蛋白表达情况，筛出最适序列。将实验分为对照组与COX-2 siRNA转染组，分别予以0、2、4、6、8Gy五个剂量组予以X线照射，使用MTT法检测辐射后细胞增殖抑制情况，平板克隆形成实验检测细胞存活分数（SF）并通过单击多靶拟合曲线计算增敏比（SER），PI单染流式细胞技术检测细胞凋亡的情况。结果转染组COX-2蛋白表达情况较对照组均下降，其中以siRNA600序列降低最为明显，后续实验均以siRNA600序列为进行转染。辐射后转染组的细胞较对照组增殖抑制作用明显增强，并随放射剂量增加而增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）。辐射后的转染组SF低于对照组，且转染组D0为3.49，Dq为1.643均低于对照组，对照组D0为6.60，Dq为2.82，放射增敏比SER为1.89，差异有统计学意义（P＜0.05）。辐射后的转染组细胞凋亡率高于对照组，且在6Gy、8Gy照射后升高更为明显。 结论 研究显示siRNA技术沉默人胶质瘤U251细胞COX-2基因表达后，辐射对胶质瘤细胞的增殖抑制作用增强，细胞的凋亡率升高，克隆形成率下降，细胞存活分数下降。本实验进一步证实了胶质瘤U251细胞COX-2基因表达的抑制可以提高放射治疗的敏感性，为胶质瘤的放射治疗提供了潜在的治疗靶点。
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