厚朴提取物及其化学成分的抗菌活性研究

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厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.,别名紫朴、紫油朴、温朴等,为木兰科、木兰属植物,为国家Ⅱ级重点保护野生植物,属于落叶乔木,具有良好的抗菌、抗炎和抗氧化作用。目前临床已用来辅助治疗阿米巴痢疾。本实验为进一步研究厚朴的抗菌活性成分,以抗菌活性追踪为主线,对厚朴甲醇提取物进行分离纯化,以期获得抗菌活性良好的单体化合物。  本实验以金黄色葡萄球菌进行活性追踪,用甲醇冷浸法对厚朴化学成分进行初步提取,用石油醚和乙酸乙酯萃取,测定各组分的抗菌活性。利用多种分离手段对乙酸乙酯层和石油醚层抗菌活性组分进行进一步的分离纯化,最终分离得到七个单体化合物。运用核磁共振氢谱、核磁共振碳谱、质谱等解析化合物的化学结构,并对单体化合物进行抑菌活性的筛选。  经结构解析,分离得到的化合物依次为化合物Ⅰ(厚朴酚)、化合物Ⅱ(亚麻酸甲酯)、化合物Ⅲ(5-allyl-(1,1-biphenyl)-2,3,4-triol)、化合物Ⅳ(和厚朴酚)、化合物Ⅴ(辣薄荷基厚朴酚)、化合物Ⅵ(邻苯二甲酸二丁酯)、化合物Ⅷ(二十四烷酸)。对23种菌株的抑菌测试结果表明,其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ具有抑菌活性。其中化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ具有显著的抑菌活性,MIC值为4~32μg/mL,其中化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ对大部分革兰氏阳性菌(变形链球菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌)和少数革兰氏阴性菌(大肠杆菌、普通变形杆菌)以及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐喹诺酮金黄色葡萄球菌的MIC值均低于阳性对照药硫酸链霉素。其中化合物Ⅰ和化合物Ⅳ对耐药菌的活性为首次报道,化合物Ⅴ的抗菌活性也为首次报道。MBC实验结果表明,其中化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的MBC普遍小于4倍的MIC,说明化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ具有较好的杀菌作用,细菌不易产生耐药性。抗癌实验结果表明,由化合物Ⅰ,Ⅳ,Ⅴ具有明显的抗癌活性,以化合物Ⅳ抗癌活性为最好。
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