大鼠骨骼肌细胞GLUT4、Akt2在间歇低氧导致胰岛素抵抗中的作用

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目的:通过构建间歇低氧大鼠模型,检测间歇低氧暴露后大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)含量以此计算稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并检测骨骼肌细胞内葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)与蛋白激酶B(PKB/Akt2)的表达含量,探讨间歇低氧对胰岛素抵抗的影响,以及GLUT4与Akt2在间歇低氧导致胰岛素抵抗中的可能作用机制。方法:选取健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,按照随机数字表法分为5组:常氧对照组(NC组),间歇低氧2周组(IH2组),间歇低氧4周组(IH4组),间歇低氧6周组(IH6组),间歇低氧8周组(IH8组),每组8只。IH2组、IH4组、IH6组、IH8组每天给予8h间歇低氧暴露(9:00~17:00),间歇低氧方案为:先输入氮气60s,使低氧舱内氧浓度由21%逐渐降至8%,保持10s后再通入氧气40s,使低氧舱内氧浓度逐渐恢复至21%,整个循环共持续110s,间歇低氧组大鼠分别于第2、4、6、8周后结束间歇低氧暴露。NC组室内环境正常饲养2周。对所有大鼠进行麻醉、标本取材,采用医用血糖仪检测各组大鼠FBG,ELISA双抗体夹心法检测FINS水平,并计算HOMA-IR。采用免疫组织化学法检测大鼠骨骼肌细胞GLUT4及Akt2蛋白的表达量,应用Scanscope数字病理扫描系统计算相应的平均灰度值。对所得数据进行统计学分析。结果:(1)与NC组相比,IH2组、IH4组、IH6组、IH8组:FBG、HOMA-IR升高,随间歇低氧暴露时间延长而显著升高(F=87.67,211.85,P均<0.05);FINS升高,其中IH2组、IH4组、IH6组,随间歇低氧暴露时间的延长而显著升高,但IH8组较IH6组下降(F=86.04,P<0.05)。(2)与NC组相比,IH2组、IH4组、IH6组、IH8组GLUT4与Akt2平均灰度值均升高,并且随间歇低氧暴露时间的延长而显著升高(F=288.63,155.61,P均<0.05)。(3)Pearson线性相关分析显示:GLUT4、Akt2平均灰度值分别与HOMA-IR呈正相关(r=0.937,0.917,P均<0.01),GLUT4与Akt2平均灰度值呈正相关(r=0.895,P<0.01)。结论:(1)间歇低氧可以引起大鼠胰岛素抵抗,并且随着间歇暴露时间的延长胰岛素抵抗程度增强。(2)间歇低氧可以引起大鼠骨骼肌细胞内GLUT4与Akt2蛋白表达水平下降,并且间歇低氧暴露时间越延长,GLUT4与Akt2蛋白表达水平均下降均越明显。(3)在间歇低氧大鼠,胰岛素抵抗与GLUT4、Akt2蛋白表达水平下降均有关,且二种蛋白表达含量的改变具有显著相关性提示二者在间歇低氧导致胰岛素抵抗的过程中可能起协同作用。
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