益气活血中药对腹膜透析生存期的影响及相关机制研究

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目的:1.临床方面:以发生腹膜炎、隧道炎、腹腔感染等腹膜透析相关感染、改变肾脏替代治疗方式、死亡等为复合终点事件,分析在广东省中医院行腹膜透析置管术的PD患者的生存情况,同时对比使用益气活血中药的治疗组与未使用益气活血中药的对照组之间生存情况的差异,探讨影响其生存情况的可能危险因素。2.实验方面:观察人参皂苷、三七皂苷对高糖腹透液(PDF)干预后的人腹膜间皮细胞(HMrSV5)的影响,并对比各实验组之间Smad蛋白、基因表达的情况。方法:1.临床方面:采用临床病例回顾性调研方法,对2011年至2015年在我院行腹膜透析置管术的PD患者进行回顾性分析,观察截至时间点为.2016年2月1日。应用Kaplan-Meier法、寿命表法及Cox回归模型分析其生存资料;根据患者在维持PD治疗过程中是否使用益气活血类中药,将所有患者分为中药治疗组和对照组,对比两组之间生存情况的差别。2.实验方面:采用随机分组细胞实验方法,使用不同葡萄糖浓度的PDF干预HMrSV5细胞,用MTT法检测不同时间段细胞的存活率,对比不同葡萄糖浓度的腹透液干预不同时间对细胞的影响;使用G2.5 PDF干预HMrSV5细胞1h作为造模组,对比空白组、模型组、人参皂苷、三七皂苷加药组之间细胞存活情况、Smad蛋白、基因表达的情况。结果:1.临床方面:共纳入158例在我院行PD治疗的患者,其原发病以肾小球肾炎(30.38%)、糖尿病性肾病(22.15%)为主。至观察时间点为止,共有54名(34.18%)患者到达终点事件,其中38名(70.37%)患者发生腹膜炎、隧道炎、腹腔感染等腹膜透析相关感染;22名(40.74%)患者改变肾脏替代方式;6名(11.11%)患者死亡。以腹膜透析相关感染为主要终点事件,患者总体中位生存时间为30月(95%CI28~32),1年、2年、3年、4年的生存率分别为82.00%、65.00%、38.00%、19.00%。中药治疗组患者中位生存时间为46月(95%CI22~70),1年、2年、3年、4年的生存率分别为80.00%、66.00%、57.00%、28.00%;对照组患者中位生存时间为29月(95%CI 28~30),1年、2年、3年的生存率分别为83.00%、64.00%、19.00%。Cox多因素回归分析提示贫血(HR3.34,95%CI 1.05-10.60,P=0.04)、血清白蛋白(HR0.81,95%CI0.71-0.92,P=0.001)、低蛋白血症(HHR0.17,95%CI0.03~0.82,P=0.03)、24h尿蛋白(HR 1.00,95%CI 1.00~1.00,P=0.04)、尿素(HR 1.07,95%CI 1.01~1.14,P=0.02)、Kt/V值(HR0.29,95%CI0.09~0.97,P=0.04)为腹膜透析相关感染的可能风险因素。以改变肾脏替代方式为主要终点事件,患者总体中位生存时间为46月(95%CI 29~63),1年、2年、3年、4年的生存率分别为93.00%、76.00%、58.00%、29.00%。中药治疗组患者中位生存时间为46月(95%CI 22~70),1年、2年、3年、4年的生存率分别为93.00%、74.00%、69.00%、35.00%;对照组患者中位生存时间为32月(95%CI 22~42),1年、2年、3年的生存率分别为93.00%、78.00%、45.00%。Cox多因素回归分析提示血清白蛋白(HR0.79,95%CI0.65~0.97,P=0.02)、尿素(HR 1.17,95%CI1.04~1.32,P=0.01)、Kt/V值(HR0.07,95%CI0.007~0.64,P=0.02)为改变肾脏替代治疗方式的可能风险因素。2.实验方面:分别使用G2.5 PDF和G4.25 PDF刺激正常HMrSV5细胞,G2.5 PDF组1h、2h、3h的细胞存活率为43.18%、21.25%、23.67%;G4.25 PDF组1h、2h、3h的细胞存活率分别为31.82%、19.50%、22.00%。造模1h,加药刺激12h后,人参皂苷的有效浓度在75μg/ml左右,三七皂苷的有效浓度在50μg/ml~75μg/ml左右;加药组Smad3蛋白表达减少,各组Smad蛋白、Smad基因表达差异无统计学意义。结论:1.临床方面:患者的血清白蛋白、尿素、尿蛋白、Kt/V值等是影响PD生存期的相关危险因素,控制血清白蛋白水平、预防低蛋白血症发生、减少尿蛋白生成对于腹膜透析患者乃至ESRD患者的整体预后具有重大意义。中药治疗组与对照组在生存期上不存在统计学差异,但根据目前生存分析结果,中药治疗组远期生存情况可能较对照组良好。2.实验方面:高糖腹透液对HMrSV5细胞有明显的细胞毒性作用,PDF葡萄糖浓度越高,作用时间越长,细胞存活率越低。人参皂苷、三七皂苷可通过TGF β-Smad信号通路改善PDF刺激后的HMrSV5细胞生存情况。
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